食用菌/菌糠多糖提取分离构效评价及其应用研究

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食用菌被认为是高蛋白、低脂肪、低热量的重要食物来源,在全球范围内被广泛栽培。然而,收获食用菌子实体后会产生大量食用菌菌糠,其存放处理对食用菌产业的持续发展带来了挑战。食用菌菌糠是一种重要的可再生生物资源,菌糠多糖开发是探索菌糠有价值产品的途径之一。但是关于菌糠多糖研究的报道较少,涉及的食用菌种类也较少,菌糠多糖的构效关系研究不够深入。本论文首先选择几种代表性的菌糠,对其多糖进行提取、成分鉴定及生物活性评价。在此基础上,以爱拔益加肉仔鸡为试验对象,进行了茶树菇菌糠多糖的动物饲养应用可行性研究;同时对蛹虫草菌糠多糖进行了分离纯化、结构表征和生物活性测试。后期进一步以刺五加栽培料生产的黑木耳为材料,研究不同培养料对食用菌多糖组成、结构和生物活性影响。本论文的主要研究成果如下:1.菌糠多糖的组分分析和生物活性评价:5种食用菌菌糠多糖均为糖蛋白复合物,含有较高含量的呈味氨基酸。蛹虫草菌糠多糖的糖质量分数高达81.7%,主要由葡萄糖组成,并含有少量的半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖。白玉菇和平菇菌糠多糖的单糖组成以半乳糖为主,茶树菇菌糠多糖主要由葡萄糖与半乳糖组成,而香菇菌糠多糖由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成。在抗氧化能力上,茶树菇菌糠多糖ORACFL值(1215μmolTrolox/g)和FRAP值(281μmolFe2+/g)最高;白玉菇和平菇菌糠多糖清除自由基(对DPPH的IC50值分别为0.86和0.85mg/mL, TEAC值分别为92.6和86.4μmolTrolox/g)的能力较强。2.茶树菇菌糠多糖对肉仔鸡生长和免疫性能的影响:整个试验期内,试验组死淘率为0;28日龄时,试验组肉鸡平均体重高于对照组;随着菌糠多糖添加量的增加,鸡血清中的溶菌酶浓度和总抗氧化能力有增加趋势。当饲料中添加0.5%菌糠多糖时,肉鸡法氏囊指数增加,鸡血清指标有较好改善,总抗氧化能力存在差异显著性,说明0.5%菌糠多糖对肉仔鸡有促进生长,提高免疫的功效。3.蛹虫草菌糠多糖的分离纯化、结构分析和生物活性评价:利用乙醇分级醇沉分离获得多糖P20、P40、P60和Ps0。P20为淀粉;P40、P60和P80为α构型吡喃糖,分子量分别为35.9、9.4、3.7kDa。P40是由1,4-Glcp和少量1,4,6-Glcp组成的葡聚糖;P60、Pso分别由甘露糖:葡萄糖:半乳糖以2.57:96.44:1.00和1.00:13.87:1.29摩尔比例组成的杂多糖。含有少量的t-Galp和1,2-Manp外,P60和Pso在其1,4-Glcp主链上Glc的O-2位和O-4位上还分别间断性随机插入了1,6-Glcp。P60的FRAP值为78.4μmolFe2+/g。P80的TEAC值为73.4μmolTrolox/g, ORACFL值为173.1 μmolTrolox/g,清除DPPH自由基的IC5o值为0.32mg/mL。P40、P60和Pso无细胞毒性,可以促进小鼠RAW264.7巨噬细胞增殖,激活免疫调节活性,促进NO释放量增加。4.刺五加黑木耳多糖的组分分析和生物活性评价:刺五加黑木耳多糖EAP1为糖蛋白复合物,半乳糖摩尔百分含量为33.9%,明显高于普通黑木耳多糖。EAP2由甘露糖、葡萄糖和木糖组成,而EAP3仅由甘露糖和葡萄糖组成。EAP1和EAP3的抗氧化性明显强于普通黑木耳子实体多糖;EAP3的吸湿率在32%的湿度下达到26.9%,与透明质酸钠接近;EAP1的保湿率为32.9%,超过普通黑木耳多糖和海藻酸钠。
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