研究背景:人体细胞膜上的癌蛋白——表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）是一种受体酪氨酸激酶,与其配体结合后介导多种细胞信号传导通路的激活,在调控正常细胞的存活、增殖、分化、迁移和凋亡等过程中发挥着重要作用。EGFR信号通路的过度激活导致细胞异常增殖,与多种肿瘤的发生发展密切相关,包括非小细胞肺癌、结肠癌、乳腺癌、头颈癌、卵巢癌等。现阶段已经开发出多种抑制剂和策略靶向治疗EGFR失调而导致的恶性肿瘤,在临床上已被用于治疗癌症患者。寨卡病毒（zika virus,ZIKV）属于黄病毒科黄病毒属,是一种单正链RNA病毒,伊蚊是其主要的传播媒介。感染ZIKV的临床表现主要包括头痛、发烧、结膜炎、肌痛、皮疹和关节痛等,尤为值得关注的是ZIKV感染与新生儿小头畸形、成人格林-巴利综合征以及病毒性脑炎、脑膜炎、脑脊髓炎等神经系统疾病的发生密切相关。由于对ZIKV的生物学特性以及致病机制缺乏充分的了解,目前国内外尚无针对ZIKV的特异性治疗药物以及有效的预防性疫苗。因此,全面系统揭示ZIKV感染的致病机制,寻找潜在的治疗靶点,是目前ZIKV研究领域中非常迫切的任务。近年来,越来越多研究表明,癌蛋白EGFR在病毒感染中也扮演着重要角色。病毒可以与EGFR相互作用并调节EGFR信号通路,以促进病毒进入、复制或逃避宿主免疫监视,通过抑制剂靶向EGFR或其下游信号通路,正成为抗病毒的重要新策略。基于此,本研究主要探讨癌蛋白EGFR及其信号通路对ZIKV复制的效应及其作用机制,为ZIKV相关疾病提供潜在治疗的新靶点。研究目的:1.探讨EGFR对ZIKV复制程度的影响。2.探讨EGFR影响ZIKV复制的分子机制。3.探讨EGFR抑制剂对ZIKV感染的作用。研究方法:1.研究EGFR促进ZIKV复制的生物学功能（1）利用RNA干扰和CRISPR/Cas9技术降低U251细胞的内源性EGFR的表达,通过RT-qPCR和Western blotting分析EGFR表达能否影响ZIKV复制。（2）构建外源性稳定高表达EGFR的细胞株,通过RT-qPCR、Western blotting和免疫荧光分析高表达EGFR蛋白能否改变ZIKV复制的程度。2.探索EGFR影响ZIKV感染的分子机制（1）利用RT-qPCR验证EGFR是否影响ZIKV的细胞吸附和穿入过程。（2）通过免疫共沉淀验证EGFR与ZIKV包膜蛋白E是否存在相互作用。（3）分析ZIKV感染是否通过激活EGFR信号通路影响病毒的复制。3.探究EGFR抑制剂是否能在体外抗ZIKV感染（1）验证EGFR抑制剂吉非替尼能否影响ZIKV细胞吸附和穿入过程。（2）验证EGFR抑制剂吉非替尼能否影响ZIKV的复制。研究结果:1.在细胞中敲低和敲除内源性EGFR后,ZIKV的复制受到抑制。2.在细胞中稳定高表达外源性EGFR后,能够促进ZIKV的复制。3.ZIKV包膜蛋白E能够与EGFR结合,并激活EGFR信号通路,促进ZIKV的细胞穿入。4.EGFR抑制剂吉非替尼能够抑制ZIKV的细胞穿入和复制。结论:综上所述,本研究发现EGFR的表达可以促进ZIKV复制,阐明ZIKV通过其包膜E蛋白结合EGFR,以及激活EGFR信号通路,促进ZIKV穿入细胞的分子机制。此外,本研究证明应用EGFR抑制剂吉非替尼能有效降低ZIKV感染。本研究不仅揭示了 EGFR促进ZIKV复制的机制,而且为将来使用EGFR抑制剂治疗ZIKV感染所致疾病提供了初步依据。