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目的:利用系统生物学方法,通过质谱技术分析鉴定正常小鼠与失眠小鼠差异蛋白的分子量及蛋白含量,寻找和甄别与失眠相关及元七胶囊治疗失眠相关的差异蛋白,从蛋白质组学角度探讨失眠的病理变化,并为元七胶囊治疗失眠的作用机制提供实验依据。方法:(1)选取180只SPF级雄性昆明小鼠随机分为六组:空白对照组、对氯苯丙氨酸(PCPA)模型对照组、元七胶囊低、中、高治疗组、艾司唑仑对照组。造模方法采用腹腔注射PCPA混悬液制备失眠小鼠模型。(2)提取各组小鼠顶叶皮层蛋白,胰蛋白酶裂解,测定蛋白浓度。采用离子轨道阱(Orbi-trap)质谱技术对各组小鼠皮层组织进行全蛋白质组表达差异分析,并对差异表达的蛋白质组采用知识挖掘方法(Ingenuity IPA数据库)进行代谢途径网络分析。(3)采用阈剂量戊巴比妥钠睡眠实验观察元七胶囊对小鼠睡眠潜伏期、睡眠时间的影响。(4)对元七胶囊组与模型组小鼠差异表达的蛋白质组采用知识挖掘方法(Ingenuity IPA数据库)进行代谢途径网络分析,结合正常组与模型组蛋白差异的结果,分析元七胶囊可能的作用机制。(5)使用Western Blot技术检测6组样品中差异蛋白质的含量,验证IPA代谢网络途经分析结果。(6)利用酶联免疫分析法(ELISA)检测各单胺类神经递质含量,对比统计分析。结果:戊巴比妥钠睡眠实验证实,元七胶囊可以缩短正常小鼠及PCPA失眠小鼠的睡眠潜伏期,延长睡眠时间;质谱共检测蛋白2206种,模型组与正常对照组获得差异表达蛋白上调的有107种,下调的88种,元七胶囊低剂量组与模型组获得差异蛋白28种,运用IPA软件对差异表达蛋白进行网络途径分析,我们发现了与失眠模型相关的6条信号通路,即氧化磷酸化、线粒体功能障碍、蛋白激酶A信号通路、褪黑素信号通路、14-3-3蛋白信号通路,GABA受体信号通路。经元七胶囊治疗后,GABA受体信号通路在元七胶囊治疗小鼠与失眠模型小鼠间产生了明显的改善作用,Western Blot验证结果显示元七胶囊小鼠皮层组织中Eif4A1、SLC32A1蛋白表达明显下降,GRIN2B、PRKACB、Gabrg2、Stmn1蛋白表达明显升高,故我们认为,元七胶囊产生镇静安眠的作用机制主要与调节GABA受体含量有关;ELISA结果表明,经元七胶囊治疗后,血清中5-HT、NE含量明显降低,GABA水平均有明显升高。结论:元七胶囊可能作用于GABA受体信号通路,与其他相关蛋白共同发挥其治疗失眠的相关作用。