一种抗心脑血管疾病药物的制备及降血脂功能研究

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α-亚麻酸(a-Linolenic Acid)学名是全顺式9,12,15-十八碳三烯酸,属于ω-3系多不饱和脂肪酸,因其明显的药理作用及丰富的营养价值而受到医学界和营养学界的极大关注。人体内不能自主生成α-亚麻酸,必须从外界食物获取,在去饱和酶及碳链延长酶的催化下合成多不饱和脂肪酸EPA(二十碳五烯酸)与DHA(二十二碳六烯酸)。EPA是人体中PGI3、TXA3等三烯前列腺素和五系白三烯的前体;DHA是构成神经系统如大脑、视网膜等的膜磷脂的重要组分。DHA和EPA在降血脂、降血压、抗血栓、抗癌以及抗过敏等方面具有显著作用。近年来随着保健食品行业的快速发展,α-亚麻酸已经成为关键的保健食品基本原料。本课题以亚麻油中具有生理活性的α-亚麻酸(α-Linolenic Acid)的分离纯化及降血脂功能研究为目的,探讨了脂肪酶催化亚麻油水解制备混合脂肪酸,考察了采用尿素包合法和β-环糊精包合法分离亚麻油中α-亚麻酸的工艺条件,并对分离得到的α-亚麻酸的降血脂功能进行了研究,为亚麻油中功能性α-亚麻酸的开发利用提供基础。具体内容如下:1.本实验所用亚麻籽水分含量为8.5%,蛋白质含量为19.3g/100g,含油率为38.5%。通过索氏提取法得到的亚麻籽油的碘值为178g/100g,皂化值为190mg/g,过氧化值为4.8mmol/kg,酸值为0.18。亚麻籽及亚麻油各项主要指标符合国家标准。2.脂肪酶作为生物催化剂水解亚麻油是在油/水乳化体系中进行的反应,其反应与多种因素有密切的关系。通过实验研究,利用数学软件matlab分别对亚麻油水解率相对应的因素进行分析拟合,再根据拟合的效果建立模型,然后结合各模型性质,建立起亚麻油水解率与各因素存在相关联的预测模型,最后经误差分析及实验验证,得出脂肪酶水解亚麻油最佳的工艺参数为:温度33℃、pH为5.9、时间为29小时、脂肪酶用量为13600u/g油、0.50的油/水,亚麻油水解率可以达到62.6%。3.利用响应面分析法对尿素包合法纯化α-亚麻酸工艺条件进行了优化。实验表明,最佳的包合反应条件为混合脂肪酸:尿素:无水乙醇(W/W/W)=1:3:7,包合温度为-20℃,包合时间为30h,此时α-亚麻酸的含量为93.27%。影响此法提取亚麻油中α-亚麻酸的因素顺序为:包合温度>无水乙醇:尿素:混合脂肪酸(W/W/W)>包合时间。4.采用β-环糊精包合法从亚麻油中分离α-亚麻酸,利用响应面分析法对β-环糊精包合法分离α-亚麻酸的提取工艺进行了优化。最佳工艺条件为:(混合脂肪酸+无水乙醇):β-环糊精=1:7,包合温度59℃,包合时间为2.7小时,冷冻时间为14.26小时。在此条件下,α-亚麻酸的含量由3.84%提高到70.01%。该生产工艺产量高、成本低、简便、易行,具有良好的工业化前景。5.把50只SPF级KM雌性小鼠分为空白实验组、高脂模型组和三个实验剂量组,对其进行α-亚麻酸降血脂试验研究。结果表明:亚麻油中α-亚麻酸能有效降低高血脂小白鼠血清中的胆固醇水平、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平,提高高密度脂蛋白胆固醇水平,能使血浆致动脉硬化指数降低,对小白鼠的高血脂症和动脉硬化有明显的抑制作用。
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