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茉莉为木犀科常绿灌木,双瓣茉莉为品种之一。茉莉有较大的经济价值、药用价值和观赏价值。茉莉花开花后一般不结实,生产上只能采用无性繁殖,主要方法有扦插、压条和分株等,长期的无性繁殖导致茉莉种性退化,抗逆性下降,花朵产量降低。因此建立一整套茉莉快速繁殖体系,一方面有利于解决因无性繁殖带来的种性退化问题;另一方面为导入抗寒、抗病等基因做好前提准备,从而对今后茉莉的进一步开发应用打下基础。此外,温度是影响茉莉生长及开花的重要因子之一,通过不同温度处理可以探讨温度对茉莉生长和开花的影响,探明茉莉的开花机理,从而为茉莉的促花、控花提供一定的理论依据,并为充分发挥茉莉的价值提供实用技术。 本试验以双瓣茉莉韵带芽茎段为外植体,通过组织培养技术建立了双瓣茉莉的组织快繁体系。另外,以一年生的双瓣茉莉植株为试验材料,进行不同温度处理,探讨温度对双瓣茉莉生长及开花的影响。实验结果如下: 1.双瓣茉莉无菌外植体的获取:取材前2天叶面喷施和浇灌稀释1000倍的25%的多菌灵可湿性粉剂溶液,剪取的枝条在饱和的无磷洗衣粉水中清洗;自来水下冲洗30 min;把长的枝条剪成3~5 cm左右的小枝条,1/1000的多菌灵与链霉素的混合溶液中浸泡3 h,清水洗净;超净工作台上75%酒精处理30 s,无菌水冲洗3~5次,添加吐温-80的0.1%升汞处理15 min,无菌水冲洗3~5次。 2.双瓣茉莉快繁体系的建立:以带芽茎段为外植体,通过筛选其各个生长阶段最佳培养基,建立了再生体系,结果表明:腋芽诱导的最适培养基为WPM+6-BA0.5 mg/L+IBA0.5 mg/L+蔗糖20 g+琼脂6.5 g;继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA2.0 mg/L+IBA0.2 mg/L+蔗糖20 g+琼脂6.5 g,增殖系数为3.03;较为理想的壮苗培养基为:WPM+6-BA(0.1、0.2)mg/L+IBA0.2 mg/L+蔗糖20 g+琼脂6.5 g;生根最佳培养基为:蛭石+NAA10 mg/L(30 mL),生根率可达100%。 3.30℃/25℃(昼/夜)处理下的双瓣茉莉植株较20℃/15℃(昼/夜)处理下的长势较好,并提前一周现蕾和成花,现蕾量高25%,表明前种温度处理更适合双瓣茉莉的营养生长和开花。成花前,植株体内积累了较高水平的可溶性蛋白和碳水化合物,在花芽分化过程中被消耗;并且,30℃/25℃(昼/夜)处理下的可溶性蛋白和碳水化合物的积累量要高于20℃/15℃(昼/夜)处理;花芽分化前期植株叶片内的POD活性升高,后期活性降低;IAA含量变化与之相对应,前期降低后期升高,低水平的IAA有利于双瓣茉莉花芽诱导,高水平IAA对后期的成花有促进作用;较高水平的ZR和ABA可以促进其开花,提高花芽诱导率;GA在花芽分化初期含量升高,对花芽诱导有促进作用,后期含量降低有利于成花。