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目的：系统性评价及比较三种补肾中药活性成分淫羊藿苷(Icariin,ICA)、柚皮苷(Naringin,NAR)、川续断皂苷VI(Asperosaponin VI,ASA VI)对体外培养原代大鼠骨髓间充质细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs,简称MSCs)及小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1Subclone14增殖及成骨性分化的影响。以期为筛选最高效的成骨中药单体及新药开发提供理论依据。材料和方法：运用全细胞贴壁法体外分离和培养原代大鼠骨髓间充质干细胞,并对其进行鉴定；复苏并传代培养小鼠MC3T3-E1细胞。配置浓度为10-3～10-8mol/L的淫羊藿菩、柚皮苷、川续断皂苷VI梯度药物溶液。首先通过ccK-8法检测各浓度淫羊藿苷、柚皮苷、川续断皂苷VI对以上两种细胞增殖活性和毒性的影响,筛选每种药物促增殖作用和毒性作用的浓度范围,并以每种药物的最佳促增殖作用药物浓度进行比较,分析药物促增殖的强弱关系。随后用以上筛选得出的三种药物的无毒性浓度组干预两种细胞,检测胞内碱性磷酸酶活性水平,筛选每种药物的最佳作用浓度。并将此浓度干预21天后的细胞进行茜素红染色、肉眼和镜下观察以及矿化能力半定量分析,从而比较淫羊藿苷、柚皮苷、川续断皂苷VI促原代大鼠骨髓间充质干细胞和MC3T3-E1细胞分化和矿化作用的强弱。结果：一、三种药物对于MSCs的影响1、ICA10-6M、NAR10-6M、ASA Ⅵ10-5M为促进MSCs增殖的最佳作用浓度。此三者比较,NAR1O-6M对MSCs增殖的促进作用明显高于ICA10-6M釉ASAⅥ10-5M、(P<0.001)2、高浓度组ICA10-3M、ICA10-4M、NAR10-3M、ASA Ⅵ10-3M、ASA Ⅵ10-4M对MSCs的增殖具有抑制作用。3、ICA10-6M、NAR10-7M、ASA Ⅵ10-5M为促进MSCs碱性磷酸酶活性的最佳浓度。此三者比较,ICA10"6M对于碱性磷酸酶活性的促进作用相对于ASA Ⅵ10-5M和NAR10-7M更为明显(P<0.05),说明ICA促进MSCs碱性磷酸酶活性作用最强。同时此三者在促进MSCs矿化时,ICA10-6M也显著优于ASA Ⅵ10-5M (P<0.05), NAR10-7M最弱(P<0.01)。二、三种药物对于MC3T3-E1细胞的影响1, ICA10-8M、NAR10-6M、ASAVI10-5M为促进MC3T3-E1增殖的最佳作用浓度。第三天ASA Ⅵ10-5M的促增殖作用明显高于NAR10-6M组(P<0.05)。第五天时,三种药物则无明显差异。2、高浓度组ICA10-3M、ICA10-4M、NAR10-3M、NAR10-4M、ASA Ⅵ10-3M、 ASA ⅥIO-4M对MC3T3-E1细胞的增殖具有抑制作用。3、ICA10-5M、NAR10-8M、ASA Ⅵ10-5M为促进MC3T3-E1碱性磷酸酶活性的最佳浓度。此三者比较ASA VI10-5M和ICA10-5M对于碱性磷酸酶活性的促进作用无统计学差异,而NAR10-8M则明显低于前两者(P<0.001),说明在作用七天时ASAVI和IcA促进碱性磷酸酶活性作用强于NAR。同时此三者在促进MC3T3-E1矿化时,ICA10-5M和ASA Ⅵ10-5M无明显差别,但两者明显优于NAR10-8M (P<0.01和P<0.05)。因此可判断,三种药物中,ICA和ASAVI促进MC3T3-E1矿化效果作用比NAR强。结论：1、三种药物对两种细胞增殖和毒性作用均反映出高浓度抑制增殖低浓度促进增殖的趋势。2、在促进细胞增殖方面,NAR对于MSCs细胞的促进作用明显强于ICA和ASA Ⅵ。对于MC3T3-E1细胞而言,三种药物促进其增殖的整体效果差异不明显。3、在促进细胞碱性磷酸酶活性及矿化方面,对于MSCs, ICA的促进作用最强,ASA VI次之,NAR最弱。对于MC3T3-E1细胞而言也得出类似的结论。4、综合而言,淫羊藿苷既能够促进两种细胞的增殖,又能够促进两种细胞的碱性磷酸酶活性及矿化,且作用是三种药物中最强的。因此淫羊藿苷是三者之中最具有开发应用价值的药物。