论文部分内容阅读
目的：卵巢癌是女性生殖系统肿瘤中死亡率最高的恶性肿瘤。患者5年生存率仅10-30％，如果能在发病早期诊断，患者5年生存率可提高到90％。肿瘤分子标志物是肿瘤细胞自身或其他细胞产生的能通过体液或体细胞标本检测的物质，在正常组织或非肿瘤性疾病不会产生或者含量微乎其微，可作为肿瘤早期诊断指标。本研究希望通过筛选卵巢癌细胞系中高表达基因，进一步利用临床组织病例样本进行验证，获得在卵巢癌中高表达蛋白。进一步分析目的蛋白质与卵巢癌临床病理学相关性以及作为卵巢癌分子标志物的可行性。 方法：首先，利用实时定量PCR(Real-time PCR)技术，在UACC-1598细胞系和卵巢癌临床样本中，对Array-CGH分析获得的19q13-11-q13.12高扩增区域所含基因转录水平筛查，初步确定在卵巢癌中转录水平增高的目的基因。然后，应用免疫组织化学(Immunohistochemistry，IHC)法检测目的基因编码的蛋白质在卵巢癌临床样本中表达情况，并分析目的蛋白质表达与卵巢癌相关性。最后，利用荧光原位杂交(，FISH)技术检测目的基因与双微体的定位关系。 结果：通过实时定量Real-time RT PCR，在UACC-1598细胞和卵巢癌临床样本中检测，CEBPA、CEBPG和HPN三个基因在卵巢癌中存在转录水平增高。免疫组织化学法验证CEBPA、CEBPG和HPN基因编码的蛋白质分别在肿瘤细胞胞质、细胞胞核和细胞胞膜上表达，且均在卵巢癌组织样本中高表达；CEBPG和HPN表达与浆液性卵巢癌之间具有相关性。FISH结果显示CEBPA、CEBPG和HPN存在基因扩增，但不是以双微体形式。 结论：CEBPA、CEBPG和HPN在卵巢癌细胞系UACC-1598中以染色体形式扩增。CEBPA、CEBPG和HPN蛋白质在卵巢癌中高表达；CEBPG和HPN表达与浆液性卵巢癌具有相关性。