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目的: 探索hBMSCs接种于不同配比PLGA-HA-PVA复合三维支架材料上干细胞的分化情况。 方法: 制备PVA质量分数分别为15wt%、10wt%、5wt%PLGA-HA-PVA复合三维支架材料,其中PLGA为30wt%,HA为5wt%。支架上接种密度为1×106/mlhBMSCs的第3代传代细胞。将上述材料分为诱导组及非诱导组(n=5),根据分组分别加上hBMSCs软骨诱导培养液或普通hBMSCs培养液,并给每组设立空白对照组(含干细胞及培养液)。每3d换液一次,观察支架周围细胞生长情况,回收培养后7d、14d、21d时培养液行ELISA定量检测Ⅱ型胶原及糖胺聚糖,培养21d后取复合材料行HE染色、免疫组化定性检测Ⅱ型胶原。采用SPSS19.0统计软件对结果进行统计分析。 结果: hBMSCs生长状况良好,细胞贴壁,纺锤形或多角。在培养后21天复合物HE染色示诱导组有细胞外基质的分泌,Ⅱ型胶原免疫组化结果显示诱导组存在棕黄色颗粒;非诱导组HE染色未见明显细胞外基质分泌,免疫组化示无明显棕黄色颗粒,表示诱导组有Ⅱ型胶原表达。诱导组培养液中Ⅱ型胶原及糖胺聚糖的含量在PVA浓度为15wt%最高,PVA浓度为10wt%次之,PVA浓度为5wt%及空白对照组最低,差异具有统计学差异(P<0.05)。非诱导组及非诱导空白对照组培养液中未测及Ⅱ型胶原及糖胺聚糖成分。 结论: PVA浓度为15wt%或10wt%的PLGA-PVA-HA三维复合支架在软骨细胞诱导液的作用下能促进hBMSCs分化为软骨细胞。且以PVA浓度为15wt%促进能力更强。