论文部分内容阅读
研究背景和目的自体脂肪移植已成为整形外科领域中修复软组织缺损的一种常用方法。尽管自体脂肪的获取和移植过程相对安全、简便,其难以预计的吸收率仍然是困扰临床医生的难题。最近的研究表明,离心后的脂肪组织会形成密度梯度,下层密度较高的脂肪组织比上层密度较低的脂肪组织具有更高的移植保留率,这在一定程度上为移植保留率的判断提供了参考。然而,研究发现,脂肪组织为了适应不同个体的能量代谢和激素水平变化,往往会不断地进行重塑,这暗示着不同个体或者同一个体不同时期的脂肪组织具有不同的特点。因此,我们需要一种更准确的方法来筛选不同个体中更适合于移植的脂肪组织部分。在本实验中,我们将玻璃密度标记浮子与梯度离心相结合,对离心后的脂肪组织进行精细划分。我们推测,玻璃密度标记浮子能够准确地区分不同密度的脂肪组织,并由此确定更适合于移植的脂肪部分。方法1、不同密度范围脂肪组织的特点比较。将5个玻璃密度标记浮子(0.925,0.930,0.935,0.940,和0.945g/ml)加入人颗粒脂肪混悬液中,以1200g转速离心3分钟。离心后,根据密度标记浮子的所在位置,将脂肪层划分为四个部分(0.925~0.930g/ml,0.930~0.935g/ml,0.935~0.940g/ml和0.940~0.945g/ml)。检测各部分的SVF细胞浓度及其中的脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)浓度、脂肪细胞直径和ECM含量,分析以上结果以哪一密度值为分界最具统计学差异,并以该密度值作为HQF与LQF的划分界线。2、高低质量脂肪远期移植情况比较。将体外实验确定的HQF与LQF进行裸鼠移植,并以Coleman脂肪作为移植对照组,对比高低质量脂肪的移植保留率、脂肪再生与血管再生情况,探讨HQF是否具有更良好的存活和再生情况。结果1、体外实验结果提示,离心后脂肪组织在SVF细胞浓度、ADSCs浓度、ECM含量和脂肪细胞直径四个方面以0.935g/ml为分界显示出显著的统计学差异。因此我们将>0.935g/ml的脂肪组织定义为HQF,<0.935g/ml定义为LQF。与LQF相比,HQF含有更丰富的SVF、ADSCs和ECM。此外,HQF的脂肪细胞直径明显小于LQF。2、体内实验结果提示,在移植后12周,HQF比LQF具有更高的移植保留率。HQF移植物的成脂基因PPAR-γ与成血管基因VEGF在移植后第1周到第4周显著高于LQF移植物。结论玻璃密度标记浮子结合梯度离心能够对离心后的脂肪组织进行准确的密度划分。>0.935g/ml的HQF由于含有更丰富的SVF细胞、ADSCs、ECM和小脂肪细胞,其作为移植物具有更高的移植保留率。因此我们更推荐将HQF用于移植。此方法在提高脂肪移植物保留率的可预测性方面具有重要的临床意义。