TGF-β超家族及其受体在性腺发育过程中发挥着重要作用。为研究生长分化因子9（Growth differentiation factor-9,gdf9）与其受体骨形成蛋白受体2（Bone morphogenetic protein receptor 2,bmpr2）和激活素受体样激酶5（activin receptor-like kinase 5,alk5）在齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）性腺发育过程中的作用,本文克隆了齐口裂腹鱼gdf9、alk5和bmpr2 cDNA全序列,且分析了其表达模式,同时探究了性腺发育过程中外源雌激素（E2）刺激对其表达量的影响。主要结果如下:1.齐口裂腹鱼gdf9 cDNA全长1958bp,编码413个氨基酸。推导氨基酸序列具有典型的TGF-β结构域,分子量约47.6 k Da。系统进化分析结果表明,其与鲤、异育银鲫和斑马鱼的亲缘关系较近。表达模式分析显示,性腺中gdf9的表达显著高于其它组织;卵巢gdf9的表达呈现先上升后下降的趋势,并在皮质小泡期达到峰值;而其在精巢中的表达趋势为先下降后上升,在精子生成晚期达到最高。2.获得的齐口裂腹鱼bmpr2 cDNA全长为3704 bp,编码的1070个氨基酸分子量约116.4 k Da。其氨基酸序列包含6个糖基化位点和1个跨膜结构域。亲缘关系分析发现,齐口裂腹鱼bmpr2与斑马鱼最近。与其它组织相比,bmpr2在性腺中的表达量最高,且卵巢和精巢中的表达量均先升高后降低,在皮质小泡期和精子生成早期达到峰值。3.获得了全长1952bp的alk5 cDNA序列。推导编码氨基酸有501个,分子量约56.5 k Da,包括N-糖基化位点2个、跨膜结构域1个和典型的SGSGSG结构域1个。系统进化树结果显示,齐口裂腹鱼alk5与斑马鱼聚为一支。alk5在性腺中的表达量显著高于其它组织;卵巢alk5表达量先升高后降低,而精巢中的表达趋势相反。4.在性腺中均能检测到Gdf9、Bmpr2和Alk5的表达。免疫组化结果显示,卵巢中的初级生长期卵母细胞、皮质小泡期和卵黄生成期卵母细胞细胞质以及颗粒细胞中均能检测到较强的Gdf9阳性信号。Bmpr2的阳性信号存在于卵母细胞细胞膜、细胞质和颗粒细胞。而Alk5主要在卵母细胞膜、细胞质和颗粒细胞中表达。精巢中,Gdf9、Bmpr2和Alk5信号均位于精原细胞、精母细胞、精子细胞和支持细胞中。5.不同浓度的E2拌料投喂对齐口裂腹鱼幼鱼的存活无明显影响。随剂量增加和处理时间延长,性腺中gdf9、bmpr2和alk5的表达量均呈现升高的趋势,这表明其表达量对E2刺激存在着时间和剂量依存效应。本研究发现,gdf9、bmpr2和alk5表达于齐口裂腹鱼不同发育时期的性腺,这表明gdf9、bmpr2和alk5通过自分泌或旁分泌方式参与了齐口裂腹鱼卵母细胞和精子细胞的发育。