非离子表面活性剂对纤维素酶促糖化的影响

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能源危机和环境污染日益恶化,利用木质纤维素生产生物酒精得到人们的密切关注。酶促糖化是木质纤维素生产生物酒精的关键步骤之一。本论文从反应动力学的角度研究了非离子表面活性剂/聚合物对纤维素酶促糖化的影响机制,为其在生物酒精生产中的应用提供了一定的理论依据和技术支持。首先,以分形动力学模型的两个参数(速率常数k和分形指数h)描述了酶促糖化的动力学过程,研究了不同反应条件下共聚物L64对稀酸预处理的玉米秸秆酶促糖化的影响。结果表明,不同条件下L64对玉米秸秆酶促糖化的促进作用都比较明显,k和h随反应条件的变化而改变。其中,高酶量、高底物浓度(高木质素含量)、高温条件下h会增高,添加葡萄糖k会降低。L64的促进作用在于消除了木质素的抑制作用,表现为h的降低。L64对纤维素酶的活性和稳定性的作用非常有限,表现为k的变化较小。其次,以Avicel PH101为底物,研究了非离子表面活性剂/聚合物对晶体纤维素酶促糖化的影响及其机制。筛选结果表明PEG10000的影响相对明显。进一步研究发现,PEG10000对Avicel的促进作用依赖于反应条件,低底物和低酶量的条件下比较明显,进一步添加β-糖苷酶后效果更明显,但高底物或高酶量的条件下不明显。酶促反应中间产物纤维二糖的浓度检测结果表明:在酶促糖化过程中,葡萄糖对β-糖苷酶具有抑制作用,使纤维二糖的分解成为限速步骤,β-糖苷酶成为限速酶。PEG10000可促进纤维素转化为纤维二糖,但对β-糖苷酶的活性无影响。当葡萄糖对β-糖苷酶的抑制作用强于PEG10000的促进作用时,后者的促进作用被抵消,检测不到还原糖浓度的提高。在酶促糖化木质纤维素或晶体纤维素的过程中,L64和PEG10000对酶促糖化纤维素的作用不同:在酶促糖化木质纤维素的过程中,表面活性剂的作用表现为消除木质素的抑制作用而与反应条件无关;在酶促糖化纤维素的过程中,表面活性剂的作用表现为对促进纤维素酶促糖化为纤维二糖而依赖于反应条件。进一步研究表明乙醇和丁醇对β-糖苷酶无抑制作用,暗示同步酶促糖化发酵在提高酶促糖化效率方面有着潜在的应用前景。
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