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本文以罗非鱼鱼鳞为原料,主要对鱼鳞脱钙技术、聚能式超声波辅助热水提取鱼鳞胶原蛋白技术以及酶解膜分离反应制备鱼鳞降血压肽技术进行了研究,进一步对酶膜耦合过程中的梯度稀释补料技术进行了研究。 本文具体的研究工作及结论如下: (1)对鱼鳞主要成分进行了分析,得出鱼鳞中蛋白质和灰分分别占鱼鳞重量的48.33%和34.97%,脂肪含量很少只有1.2%;鱼鳞蛋白为典型动物胶原蛋白的氨基酸组成。 (2)采用盐酸对鱼鳞进行了脱钙技术研究,以脱钙率为指标,得出最佳的脱钙条件为:脱钙料液比1∶20、时间80min、酸浓度0.5mol/L,此条件下脱钙率可达到99.42%,脱钙后鱼鳞的灰分含量为0.32%。 (3)以脱钙后的鱼鳞为原料,利用超声波辅助热水提取技术进行胶原蛋白提取试验研究,得出最佳的提取胶原蛋白条件为:提取温度80℃,液料比40mL/g、提取时间60min、pH6、脉冲超声发声时间8s与间歇时间5s,在此条件下提取率为81.25%。与传统热水提取比较,超声辅助提取的提取率增加了20.71%。通过多元线性回归拟合,得到了胶原蛋白提取率与提取液温度、液料比以及超声提取时间之间的数学模型,得出胶原蛋白提取率的模型预测值与实测值之间无显著性差异。对超声处理前后的胶原蛋白进行了傅立叶变换红外光谱分析结果表明,超声处理后蛋白的酰胺Ⅰ和酰胺Ⅱ最大波峰发生了改变,说明超声处理前后胶原蛋白的二级结构发生了变化。 (4)以提取的胶原蛋白为原料,以DH、ACE抑制率为指标,采用超声波辅助碱性蛋白酶酶解技术进行降血压活性肽制备技术研究,得到最佳工艺为:酶解时间25min,酶解温度50℃、pH8.7、加酶量0.14AU/g、底物浓度2%,在此条件下得到的多肽ACE抑制率为69.37%。通过多元线性回归拟合,得到了ACE抑制率与pH、加酶量以及底物浓度之间的数学模型,ACE抑制率的模型预测值与实测值之间无显著性差异。 (5)在超声辅助酶解鱼鳞胶原蛋白最佳反应条件下,利用稀释梯度补料酶膜耦合反应技术,进一步改善酶解反应效果,得出最佳的稀释梯度补料模式为每5min补一次料,每隔25min降低0.2%浓度梯度,此时单位酶产肽量为9.51g肽/(AU酶)、IC50为1.06mg/mL及蛋白转化率为28%。单位酶产肽量为不补料效率的2.71倍。