牡丹籽粕多糖的化学修饰及其抗氧化和抑菌能力的研究

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牡丹籽粕是牡丹籽油加工的副产品,随着牡丹籽产业的兴起,牡丹籽粕的开发利用广受关注。本论文对连续提取的四种牡丹籽粕多糖进行了硫酸化修饰、磷酸化修饰和羧甲基化修饰,测定了修饰后多糖的理化性质,分析比较了牡丹籽粕多糖及其修饰产物的体外抗氧化活性以及抑菌和抗凝血特性。研究结果为把牡丹籽粕多糖的不同修饰产物开发为食品、新型抗氧化剂、抑菌剂和抗凝血剂建立了基础。牡丹籽粕多糖的修饰。牡丹籽粕多糖PSDPs经硫酸化修饰、磷酸化修饰和羧甲基化修饰,分别得到相应的修饰后产物S-PSDPs、P-PSDPs和C-PSDPs。紫外吸收峰检测显示三种修饰后多糖与天然多糖相比具有相似的最大吸收峰。S-PSDPs在1250 cm-1处有S=O键的不对称伸缩振动引起的吸收峰,在588 cm-1和830 cm-1附近存在O-S-O,C-S-O的伸缩振动引起的吸收峰;P-PSDPs在1033 cm-1处有P-OH引起的吸收峰,在1245 cm-1附近有P=O键的不对称伸缩振动引起的吸收峰,在898 cm-1附近处有P-O-C引起的吸收峰;C-PSDPs在在1596、1422和1328 cm-1处出现由-COO、C-H、C=O引起的吸收峰。牡丹籽粕多糖修饰产物的抗氧化性质。通过还原能力测定、DPPH自由基清除能力测定、ABTS自由基清除活性测定、羟基自由基清除活性测定和亚铁离子螯合能力测定,探索比较分析未修饰多糖、硫酸化修饰多糖、磷酸化修饰多糖以及羧甲基化修饰多糖的抗氧化活性。结果表明,硫酸化多糖具有最高的还原能力、DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除活性;磷酸化多糖表现出最大的羟基自由基清除活性和亚铁离子螯合能力:羧甲基化多糖体外抗氧化活性未见显著增强。这说明化学修饰的官能团可能会致使多糖的抗氧化能力发生变化,但不同的化学基团所造成的改变不尽相同。牡丹籽粕多糖修饰产物的抑菌特性。以抑菌圈大小、最小抑菌浓度以及菌体生长曲线为指标,评价了牡丹籽粕多糖PSDPs及其化学修饰产物S-PSDPs、P-PSDPs和C-PSDPs对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌的抑制作用。结果表明PSDPs及其衍生物对四种细菌均表现出明显的抑制性。在四种多糖组分中,热缓冲液可溶性固体HBSS具有最大的抑菌活性;对于修饰的衍生物,硫酸化修饰部分(S-HBSS)对所有四种受试生物体表现出最大的抗菌活性,其次是羧甲基化和磷酸化衍生物;在四种测试的细菌菌株中,观察到鼠伤寒沙门氏菌被所有多糖级分最有效地抑制。以上结果表明,S-HBSS具有潜在的抑菌活性,将来可能在天然抗菌食品中发挥作用。牡丹籽粕多糖修饰产物的抗凝血活性。采用试剂盒法利用半自动凝血仪测定了牡丹籽粕多糖及其化学修饰产物的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)等体外抗凝血指标。结果显示天然牡丹籽粕多糖及其修饰产物均具有一定的抗凝血作用,但抗凝血能力差异较大。在四种多糖组分中,螯合剂可溶性固体CHSS及其多糖修饰物的抗凝血效果最好。对于三种修饰方式,硫酸化修饰多糖的抗凝血活性较突出,并且随着多糖浓度的增加抗凝血效果增强,具有明显的浓度依赖性。其次,所有凝血均不是外源性途径,而是抑制内源性凝血途径和凝血酶介导的纤维蛋白形成来完成抗凝血作用。
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