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苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis Berliner,简称Bt）是目前应用最广的一类微生物杀虫剂,在过去的30多年中得到广泛的研究和应用。Bt的主要杀虫活性与其携带的编码ICPs（Insecticidal Crystal Proteins,ICPs）的cry基因密切相关,因此,cry基因工程研究便成为近几年研究的热点。自Schnepf和Whiteley（1981）分离克隆了第一个Bt cry基因以来,到目前为止,国际上已经克隆了325种杀虫蛋白基因,但是随着Bt应用的不断扩大,Bt ICPs基因均在不同程度上引发了昆虫的抗性,寻找新的高毒力菌株及基因是解决昆虫抗性问题的有效途径之一。本研究根据GenBank中cry2类基因序列设计引物对P1P2,扩增得到cry2基因片断,通过对此片断的序列分析,设计了全长引物对P3P4,以苏云金芽孢杆菌新菌株S249质粒DNA为模板,再次扩增得到一大小约为2.0kb的全长基因,并克隆到pGEM-T Easy载体上,通过引物步行法测定该基因长1919bp,其中开放阅读框（ORF）长1902bp,编码633个氨基酸,经DNASTAR软件分析,初步预测其蛋白分子量为70.72ku,等电点pI=8.26。序列比较结果表明,该基因与cry2Ad类基因高度同源（同源性达99%）只有2个核苷酸差异和1个氨基酸差异,已在GenBank中登录,登录号为DQ219823,并被Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry2Ad2。将cry2Ad2基因克隆到表达载体pET28a（+）上,得到重组质粒pE2d,然后转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,利用IPTG诱导进行表达。经SDS-PAGE检测,发现转化菌株BL21（pE2d）能正确表达Cry2Ad2蛋白,其分子量约为70ku左右。对表达的Cry2Ad2蛋白进行生物测定,结果表明,Cry2Ad2蛋白对四龄淡色库蚊（Culex pipiens）和三龄小菜蛾（Plutella xylostella）72小时的的LC50分别为205.3469μg/ml和307.2562μg/ml,对粘虫（Leucania separata）幼虫的生长发育也有明显的抑制作用。新cry基因的克隆,不但为cry基因家族增添了新成员,而且为构建新型转基因工程菌和转基因植物,提供了基因材料。