Nd:YAG激光对污染种植体表面特性的改变及巨噬细胞极化影响的研究

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研究背景:种植体周围炎治疗的目的在于彻底清除种植体表面的细菌污染物,同时改变种植体周围的炎症状态。种植体周围的巨噬细胞M2向分化是控制炎症,促进骨再生的关键。研究表明种植体表面形貌、亲水性等表面特性能够影响巨噬细胞极化,亲水性较高的大颗粒喷砂酸蚀(SLA,Sandblasted,large-grit and acid-etched)钛表面能够降低TNF-α、IL-1、IL-6的分泌来减少巨噬细胞的促炎反应。相关研究证实掺钕钇铝石榴石(neodymium-doped yttrium aluminium garnet,Nd:YAG)激光对于口腔致病菌杀灭能力较强,可以显著控制炎症,改变种植周围的炎症状态。但高功率的Nd:YAG激光会引起热损伤,破坏种植体表面结构。Nd:YAG激光由于参数设定等原因,去污的同时会改变钛表面的理化特性,但不同能量的Nd:YAG激光改变的差异是什么,目前尚不清楚。针对目前Nd:YAG激光表面去污处理的国内外研究现状,本项目通过构建污染钛种植体模型,探讨不同能量参数的Nd:YAG激光表面去污处理对钛表面理化特性的影响;以巨噬细胞极化与炎症反应的关系为切入点,深入探讨这种表面特性的改变对巨噬细胞活力及极化状态的影响。本研究有望为Nd:YAG激光在种植体周围炎的治疗中提供新的思路。研究方法:1.体外构建污染种植体模型,使用0.5W及1.0W的Nd:YAG激光对其进行去污染处理,使用扫描电镜、原子力学显微镜和接触角分析仪来评估不同钛表面的形貌特征。2.采用活/死细胞荧光染色及CCK-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)方法检测不同功率的Nd:YAG激光处理后的污染种植体表面对巨噬细胞生长的影响3.采用流式细胞仪、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测巨噬细胞 M1 型及M2型极化的活性。研究结果:1.Nd:YAG激光去污染处理后,原有的钛表面形态发生了改变,与Control组相比,表面粗糙度显著增加(P<0.05)。与SLA组相比,钛表面的亲水性显著增加(P<0.05)。2.Nd:YAG激光去污染处理后对巨噬细胞生长活力没有影响,CCK-8结果显示与Control组及SLA组相比,显著促进巨噬细胞增殖(P<0.05)。3.Nd:YAG激光去污后钛表面的巨噬细胞CCR7阳性细胞检出率降低,CD206阳性细胞检出率升高(P<0.05)。炎症细胞因子IL-1β和TNF-α的分泌减少,而抗炎细胞因子IL-4和IL-10的分泌增加(P<0.05)。炎症相关基因IL-1β、TNF-α、IL-6和iNOS水平显著降低,抗炎基因IL-4、IL-10和TGF-β的表达显著上调(P<0.05)。研究结论:1.Nd:YAG激光去污染处理改变了钛表面形貌,增加了表面的粗糙度及亲水性2.Nd:YAG激光去污染处理对钛表面的改变抑制了 M1型巨噬细胞的极化,促进了 M2型巨噬细胞的极化。
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