人胚脑神经干细胞的分离培养和鉴定及bFGF、EGF对脑缺血大鼠自体神经干细胞增殖的影响

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目的:探讨人胚脑神经干细胞的体外生长特性、分化情况和培养条件,为相关实验研究提供条件。 材料与方法:利用神经干细胞的条件培养基,对从9周和12周胚龄的自然流产胎儿分离的前脑、后脑进行神经干细胞培养,比较其生长特性,并分别观察在无生长因子的基础培养基以及含有胎牛血清的培养基中神经干细胞的分化情况。以免疫荧光细胞化学技术检测神经上皮干细胞蛋白(Nestin)和分化后神经细胞抗原的表达。 结果:两胚龄前、后脑组织中均分离出神经干细胞,他们均表达Nestin抗原阳性。在无生长因子的基础培养基和含有胎牛血清的培养基中神经干细胞均发生分化,表达神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。9周胚龄的脑组织原代培养形成细胞克隆的比例高于12周胚龄的脑组织。在条件培养基存在的情况下,后脑组织分离的神经干细胞比前脑组织来源的更容易分化。 结论:从人胚脑组织的前、后脑中分离出神经干细胞;较小胚龄的脑组织原代培养时细胞克隆的形成比例较高;后脑组织分离的南京医科大学硕士学位论文神经干细胞比前脑组织来源的更容易分化。
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