弱毒菌株立枯丝核菌B36的研究

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真菌病毒是一类侵染真菌的病毒,在植物病原真菌中普遍存在。目前已报到的真菌病毒多为ds RNA和正单链RNA病毒,少数为负单链RNA病毒和一例DNA病毒。发现的部分真菌病毒可以引起植物病原真菌致病力衰退,该类真菌病毒具有防治真菌病害的潜力。茄丝核菌引起的水稻纹枯病每年造成水稻大量减产,自茄丝核菌中筛选与弱毒相关的病毒是防治水稻纹枯病的潜在策略之一。基于前期茄丝核菌RNA宏转录组数据,发现八个与减病毒有同源性的contig序列,并确认该contigs序列是一种新的减病毒基因组部分序列,该减病毒暂时命名为茄丝核菌减病毒1(Rhizoctonia solani hypovirus 1,Rs HV1)。通过RT-PCR技术,确认茄丝核菌菌株B36携带有Rs HV1。ds RNA提取,证实菌株B36中至少含有5个ds RNA片段,进而对这些ds RNA片段克隆分析。结果表明菌株B36至少含有4个不同的病毒,除了减病毒RSHV1外,其他三个病毒分别与已报道的茄丝核菌RNA病毒HN008(登录号:YP_09158859.1)、茄丝核菌ds RNA病毒1(登录号:AFZ85210.1)和茄丝核菌ds RNA病毒2(登录号:YP_009011230.1)有同源性。基于获得八个contig序列,利用RT-PCR和测序获得contig间未知序列,最终得到了7087bp的c DNA序列,含有一个不完整的ORF,编码含有2362个氨基酸的残基。多重比对分析表明该氨基酸序列与核盘菌减病毒2(Ss HV2)相应序列有54%的相似性,与板栗疫菌减病毒1(CHV1)21%的相似性。因此,推定Rs HV1属于减病毒科病毒。菌株190(不携带Rs HV1)和菌株B36对峙培养,Rs HV1可以水平传播至菌株190中,但菌株B36中其他病毒未能传播至菌株190中。携带有Rs HV1新菌株呈现弱毒特性,该结果表明Rs HV1与茄丝核菌弱毒特性相关,且具有强侵染特性。菌株B36和核盘菌菌株N36对峙培养,发现Rs HV1可以成功的从茄丝核菌(担子菌门)通过菌丝接触传播至核盘菌(子囊菌门)菌株中,表明Rs HV1可以突破真菌门进行传播。综合以上研究结果,菌株B36含有多种病毒,其中病毒Rs HV1是首个在茄丝核菌中报道的减病毒。RSHV1与茄丝核菌的弱毒现象相关,具有强侵染能力,用于生物防治的潜力大。
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