目的：观察大鼠癫痫持续状态(SE)后2周内海马KCC2及GABAARα1蛋白的表达，及使用BDNF中和性抗体血清(anti-BDNF)干预后其表达的变化，探讨KCC2在SE及反复自发性癫痫发作形成中的可能机制及其与GABAARα1的关系，及BDNF在SE发生过程中对KCC2和GABAARα1蛋白表达的影响。 方法：25只正常大鼠随机分为假手术组、90min组、180min组、270min组和360min组，每组5只，立体定向侧脑室内注射anti-BDNF(假手术组注射正常羊血清)，相应时间处死后用Western Blot检测海马BDNF蛋白的含量。健康成年雄性SD大鼠130只，随机分为生理盐水对照组(10只)，SE组(60只)和干预组(60)只)。利用氯化锂-匹罗卡品(LiCl-PILO)腹腔注射制作大鼠SE模型(SE组)，在LiCl-PILO致痫前3h立体定向侧脑室注射anti-BDNF制作干预组模型(干预组)，两组均选取SE后2h、6h、24h、3d、7d和14d为实验点。观察两组大鼠在SE诱发过程中的行为学差异，Nissl染色观察两组海马神经元的损伤情况，Western Blot检测各组大鼠海马KCC2、GABAARα1及BDNF蛋白的表达，利用免疫荧光检测海马各区KCC2和GABAARα1蛋白时空分布的特点。 结果： 1.anti-BDNF注射后3h，海马BDNF蛋白含量降至最低。 2.动物实验结果：与SE组相比，干预组SE诱发成功率低(分别为90.0％和75.6％)，SE诱发成功后生存状态好，死亡率低(分别为16.67％和7.69％)。与SE组相比，干预组诱发SE所需PILO平均用量(分别为24.62±5.49 mg/kg和34.56±9.01mg/kg)、诱发SE所需的平均时间(分别为27.90±13.59min和55.86±17.48min)、Ⅲ级及以上发作平均持续时间(分别为28.13±4.66min和12.77±5.06min)及10％水合氯醛总量平均值(分别为0.38±0.63ml/1 00g和0.32±0.03 ml/1 00g)均有明显差异，具有统计学意义(p<0.01)。 3.Nissl染色结果：SE组在SE后2h开始出现CA1区锥体神经元丢失和坏死，3d最严重，7d后开始改善；CA3区锥体神经元受损情况与CA1区相似，程度稍轻；门区除了锥体神经元中等程度的丢失和坏死外，还可见锥体神经元突起增多及较多颗粒细胞样的神经元。SE后3d至7d可见齿状回显著神经细胞增生。干预组CA1区在SE后2h可见极少量坏死神经元，6h-24h坏死神经元数量增多，3d时开始恢复，14d时基本恢复正常；CA3区神经元坏死出现较早且较明显，以24h最为明显，7d开始恢复；门区锥体神经元的坏死和丢失以SE后6h最明显，24h可见较多具有多个突起的锥体神经元和少量颗粒细胞样新生细胞，3d后细胞数量及形态开始恢复。齿状回24h后可见神经细胞增生。与SE组相比，干预组在SE后急性期内的病理改变相似，程度明显减轻，恢复快，未遗留明显的海马组织病理学改变，尤以SE后3d开始差异明显，具有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。 4.KCC2蛋白的表达：SE组KCC2蛋白在SE后2h开始显著下调，6h降至最低，24h开始恢复，14d时仍低于正常。以上各时间点海马KCC2蛋白的表达与正常值相比均有显著差异(p<0.01)。在海马不同亚区，从SE后2h开始，KCC2蛋白表达显著降低首先出现在CA1区，之后是CA3区，齿状回的改变较轻。干预组KCC2蛋白表达在2h显著减少，6h达最低，24h后开始明显恢复，3d时接近正常。干预组2h、6h、24h和3d蛋白含量与对照组相比差异显著，具有统计学意义(p<0.01)。KCC2蛋白在海马各区的时空分布趋势与SE组相似。干预组与SE组相比，SE后2h-3d各时间点KCC2蛋白的表达差异非常显著(p<0.01)，7d和14d的差异明显(p<0.05)，均具有统计学意义。 5.GABAARα1蛋白的表达：SE组GABAARα1蛋白在SE后2h-6h表达显著下调(p<0.01)，24h时GABAARα1蛋白含量显著上升，至14d达到最高值(约为正常值的134.85±4.51％，p<0.01)。GABAARα1蛋白免疫阳性反应在海马不同亚区表达具有较大的差异。SE后2h开始，CA1区及CA3区的GABAARα1蛋白表达显著进行性下调，DG区GABAARα1蛋白表达则呈显著上升趋势，直至14d时仍继续增加。干预组GABAARα1蛋白表达在SE后2h达最低值，6h后上调，3d达最高值(p<0.01)，7d后下调至接近正常值。GABAARα1蛋白表达在海马的空间分布特点与SE组相似。与SE组相比，干预组GABAARα1蛋白表达变化的幅度小，周期短，两组GABAARα1蛋白表达在SE后24h、7d和14d各时间点的差异显著，均具有统计学意义(p<0.01)。 6.BDNF蛋白的表达：SE组BDNF蛋白含量在SE后6h开始明显增加，24h达高峰，3d时开始下调，至7d时仍显著高于正常值，约为正常值的123.74±5.43％，与对照组相比，以上各时间点的差异均具有统计学意义(p<0.01)，14d时BDNF蛋白表达接近正常。干预组BDNF蛋白含量在SE后2h降低，6h显著增加，24h达最大值，约为正常值121.56±2.63％，与对照组相比，以上各时间点的差异均具有统计学意义(p<0.01)，3d时接近正常。与SE组相比，干预组BDNF蛋白的含量及变化幅度均明显低于SE组。从SE后6h至7d，两组相同时间点BDNF蛋白含量差异显著，具有统计学意义(p<0.01)。 结论： 1.KCC2蛋白表达在SE后长期下调可能是SE后GABAAR介导的兴奋性作用产生的重要机制之一，且可能参与了SE后海马MFS及突触重建的形成，是SRS形成的机制之一。 2.SE过程中，BDNF可能通过下调KCC2的表达来影响GABAAR介导的抑制性作用，这可能在PILO诱导SE模型急性期的病理改变中起着重要的作用。 3.Anti-BDNF干预可以通过抑制BDNF的表达，减弱神经活性依赖性的KCC2及GABAAR抑制作用的下调，延缓癫痫发生并减弱癫痫发作的严重程度和严重发作的持续时间，具有一定神经保护作用。