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目的:肝细胞生长因子(HGF)最初是作为一种分裂素从培养的肝细胞中被识别、提纯和克隆。HGF是一种多功能的细胞因子,在生长发育过程中以及许多病理状态下,发挥着重要的作用。最近的研究发现,HGF是一种多功能的神经营养因子,无论是在中枢神经还是在周围神经中,它都有刺激血管生长,促进损伤组织修复和再生的作用。许多的动物实验证明,在脑缺血后,HGF的表达升高。本课题主要是通过制作大鼠液压颅脑创伤的模型,对HGF在脑创伤后的表达情况进行研究,探讨其在脑创伤后的作用及机制,为临床治疗脑创伤的新策略提供实验基础。
方法:成年Wistar大鼠96只,随机分为8组,每组12只,其中一组是假手术组,即对照组,另外7组为实验组,按照伤后取材时间,分为2h、6h、12h、24h、72h、168h、336h组,实验组和对照组都使用标准化的手术步骤。实验组用液压冲击损伤方法造成大鼠中度闭合性脑创伤,对照组不进行液压冲击致伤。伤后进行生命体征监测、神经行为学评分。将每组大鼠再随机分为两个亚组,每亚组6只,一组进行HE及免疫组化染色,观察伤后病理变化及HGF表达的部位和表达量,另外一组用RT-PCR的方法从基因水平观察不同组大鼠伤后HGF表达情况。
结果:免疫组化染色示:伤后24小时开始,创伤边缘区HGF阳性细胞数开始增多,伤后168小时阳性细胞数达高峰,伤后336小时阳性细胞数有所下降,但仍处于高于伤前的水平。RT-PCR结果示:创伤后72小时开始,HGFmRNA表达量增加,创伤后168小时达高峰。
结论:在创伤后的大鼠大脑皮层组织中,HGF在蛋白水平以及基因水平都出现表达增高的情况。HGF作为神经营养因子和血管生长因子,可能参与了脑创伤后神经元的保护和组织的修复和再生。