本论文研究的主要内容是设计合成了一系列新型硼酸功能化材料,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和凝胶电泳（SDS-PAGE）技术,发展了对辣根过氧化物酶（HRP）、人免疫球蛋白G（Ig G）以及核糖核酸酶B（RNase B）标准糖蛋白以及糖肽分离富集的新方法,并且将这种新方法成功的应用于人血清实际样品中糖蛋白的分离富集。糖基化作为蛋白质重要的翻译后修饰之一,广泛存在于一半以上的蛋白质中,并且在分子识别、细胞生长、免疫反应等生命过程中都发挥着重要的作用,糖基化的异常与众多疾病例如乳腺癌、前列腺癌等息息相关。因此对于糖蛋白的研究是蛋白质组学的一大热点。然而,蛋白质的糖基化具有微不均一性,且在生物样品中成分复杂,糖蛋白的丰度较低,在质谱检测时被其他的高丰度蛋白所掩盖,使质谱分析仍面临着巨大的挑战。因此,为了更好地研究糖肽和糖蛋白就需要在质谱分析前实现糖肽/糖蛋白的分离富集。至今,已发展了多种糖肽/糖蛋白的富集方法,但仍存在诸多问题,例如合成材料引入重金属离子具有生物毒性、适用范围窄、富集效率低、操作步骤复杂、富集后需要除盐损失样品等。针对这些问题,本论文设计并发展了一系列新型硼酸功能化材料,分为两个部分进行阐述。主要内容如下:第一部分介绍了两种基于“点击”化学的硅胶基质新型硼酸功能化材料,富集糖肽/糖蛋白,并且用MALDI-TOF MS和SDS-PAGE进行了分析研究。首先,我们利用无铜催化的巯基-炔基“点击”化学原理,合成一种巯基-炔基硼酸功能化材料,经过红外表征,表明了材料制备成功。富集条件优化后发现采用高有机相碱性条件（80%ACN/NH3H2O,p H11）上样、洗涤,低有机相酸性条件（50%ACN/1%FA）洗脱能够得到较好的糖肽、糖蛋白的富集效果。其次,我们又利用无铜催化的叠氮基-氰基“点击”化学原理,合成一种利用叠氮基-氰基反应合成的苯硼酸功能化材料,经过红外表征,表明了材料制备成功。富集条件优化后发现采用高有机相（85%ACN/1%TFA）上样,低有机相（70%ACN/1%TFA）洗脱就能得到较好的糖肽、糖蛋白的富集效果。相比巯基-炔基硼酸功能化材料而言,此方法避免了富集过程中强碱条件对于材料稳定性的影响。这两种材料合成方法简单,绿色环保;富集方法简单高效,不需要除盐,避免了样品损失,保证了检测的灵敏度,均成功的实现了对标准糖肽/糖蛋白的分离富集并且成功的对5μL人血清中糖蛋白的分离富集,基本去除了血清白蛋白（HSA）的干扰,表现了较强的选择性。第二部分介绍了一种以氧化石墨烯（Graphene oxide,GO）为载体,壳聚糖（Chitosan,CS）和苯硼酸为功能基团的新型硼酸功能化材料GO/CS/phenylboronic acid。相比较前两种材料而言,GO/CS/phenylboronic acid的酸碱耐受性较强,富集通量较大,结合位点较多。经红外表征后表明材料制备成功,优化富集条件后,发现采用高有机相碱性条件（80%ACN/NH3H2O,p H11）上样、洗涤,低有机相酸性条件洗脱（50%ACN/1%FA）的条件用于分离富集糖肽/糖蛋白效果最好。GO/CS/phenylboronic acid功能化材料能够同时提供亲水、亲和作用,合成方法简单,绿色环保,并且材料富集效率高,成功用于标准糖肽/糖蛋白的富集,并且在2μL正常人血清的实际样品中分离富集糖蛋白,基本去除了HSA的干扰。本研究开发的三种新型硼酸亲和材料能够为今后开发高效的糖蛋白质分离材料提供有意义的借鉴,因此具有较强的现实研究意义。