目的:肺癌属于常见的恶性肿瘤,由于肺癌细胞易迁移、高侵袭、难治愈使得其发病率和死亡率一直高居不下。肺癌的高死亡率与其早期转移有着密切的关系,而转移是一个复杂的过程,由很多步骤调控。转移的主要特征为发生上皮-间充质细胞转化（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）现象,EMT现象在胚胎发育以及癌细胞的侵袭和迁移过程中扮演着重要角色。长链非编码RNA（long noncoding RNA,LncRNA）与多种生物学分子相互作用,调控细胞相关生物学行为,如可以调控肿瘤细胞的迁移、侵袭,但在肺癌中与EMT相关的LncRNA却鲜有报道。鉴于此,本课题针对参与肺癌细胞EMT过程的LncRNA进行研究,扩充人们对LncRNA功能的认识,期望找到与肺癌细胞迁移侵袭密切相关的生物标志物,为临床肺癌的治疗提供理论依据。方法:1.筛选LncRNA:依据TGF-β诱导肺腺癌细胞A549构建EMT模型的LncRNA芯片结果,初步筛选与EMT相关的表达下调的LncRNA。2.LncRNA的验证:利用TGF-β诱导A549细胞构建EMT模型,在该模型中利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术验证初步筛选的LncRNA在EMT模型中的表达情况。3.全长鉴定:通过Rapid Amplification of c DNA Ends（RACE）扩增基因5’端和3’端,并通过Taq高保真酶扩增基因全长。4.基因表达:经qRT-PCR验证目的基因在肺癌细胞、肺癌癌旁组织和肺癌组织中的表达情况。5.核质定位分析:对选取的细胞系进行核质分提,通过qRT-PCR检测目的基因的核质定位。6.构建稳转细胞系:利用载体pc DNA3.1在HTB177细胞系中构建稳定过表达细胞系;利用载体p LKO.1在A549细胞系中构建稳定敲降细胞系。经qRT-PCR鉴定过表达和敲降效率。7.功能研究:经Transwell小室法检测HTB-177和A549稳转细胞系的细胞迁移和侵袭能力。结果:1.成功筛选并验证出在TGF-β诱导A549细胞构建的EMT模型中表达下调的LncRNA TBDR12。2.LncRNA TBDR12不具有蛋白编码潜能。RACE和全长扩增实验鉴定其在A459细胞中的转录本全长为1982nt,有Poly（A）尾,且在A549和HTB177细胞系中主要定位于细胞核。3.肺癌组织中的LncRNA TBDR12的RNA表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.01）。4.qRT-PCR结果显示在HTB177稳转过表达细胞系中,实验组pc DNA3.1（+）-TBDR12的RNA表达水平明显高于对照组pc DNA3.1（+）;在A549稳定敲降细胞系中,实验组sh1、sh2的RNA表达水平明显低于对照组p LKO.1。5.Transwell小室实验表明,在HTB177细胞系中,实验组pc DNA3.1（+）-TBDR12细胞侵袭和迁移能力均小于对照组pc DNA3.1（+）细胞（P＜0.05）;在A549细胞系中,敲降组细胞的迁移和侵袭能力明显大于对照组p LKO.1细胞（P＜0.05）。结论:1.成功筛选出EMT过程中表达下调的LncRNA TBDR12。2.LncRNA TBDR12不具有编码潜能,其在肺癌细胞A459的转绿本长度为1982bp,有Poly（A）尾,且在A549和HTB177细胞系中均主要定位于细胞核。3.LncRNA TBDR12在肺癌组织中的表达水平低于癌旁组织。4.在HTB177细胞中,过表达LncRNA TBDR12后细胞的侵袭和迁移能力被抑制;而在A549细胞中,敲降LncRNA TBDR12后增加了细胞的侵袭和迁移能力。