【摘 要】
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松乳菇是一种在野外与松树共生的外生菌根真菌,具有重要的食药用价值。松乳菇在我国分布广泛,但是由于松乳菇特殊的共生生长方式,人工驯化栽培仍然存在难度。国内外对松乳菇的研究主要集中在营养与活性成分、发酵与栽培技术等方面,对松乳菇菌种鉴定、营养成分的快速检测等方面鲜有研究。本论文从松乳菇的菌种分离鉴定、离体栽培、营养成分的快速测定三个方面进行了研究。采集了我国南方部分地区野生乳菇属真菌子实体,采用组织分
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松乳菇是一种在野外与松树共生的外生菌根真菌,具有重要的食药用价值。松乳菇在我国分布广泛,但是由于松乳菇特殊的共生生长方式,人工驯化栽培仍然存在难度。国内外对松乳菇的研究主要集中在营养与活性成分、发酵与栽培技术等方面,对松乳菇菌种鉴定、营养成分的快速检测等方面鲜有研究。本论文从松乳菇的菌种分离鉴定、离体栽培、营养成分的快速测定三个方面进行了研究。采集了我国南方部分地区野生乳菇属真菌子实体,采用组织分离方法获得菌株Lac.1、Lac.2、Lac.3、Lac.4、Lac.5、Lac.6、Lac.7,基于r DNA ITS序列对上述7个菌株进行了分子鉴定,分析了菌株的单倍型、序列同源性、遗传距离和系统发育,确定了上述7个菌株的种属地位。选用松乳菇菌株Lac.1、Lac.2、La c.3进行了离体栽培研究,制备了Lac.1、Lac.2、Lac.3原种和栽培种,采用覆土和补充营养液等方法诱导松乳菇出菇。利用中红外光谱技术结合化学计量方法建立了松乳菇子实体可溶性多糖与可溶性蛋白质含量的PLS预测模型。得到如下结果:（1）上述7个乳菇属菌株呈现7个独立单倍型;菌株Lac.1、Lac.2、Lac.5、Lac.6的序列同源性与遗传距离接近松乳菇;系统发育分析显示Lac.1、Lac.2、Lac.3、Lac.4、Lac.5、Lac.6与松乳菇聚为同一分支,Lac.7与鲜艳乳菇聚为同一分支,准确地将7个乳菇属真菌完成了分类鉴定。（2）松乳菇菌株Lac.1、Lac.2、Lac.3能够在PDA液体培养基中良好生长,其栽培种均能获得高生物量的菌丝体;在温度25℃、相对湿度80%、每隔12 h散射光800 Lux照射,出菇诱导培养约30 d,松乳菇菌丝体布满2 L塑料方形容器,覆土与补充营养液能够促进松乳菇菌丝的生长,但未能刺激松乳菇出菇。（3）选择800～2950 cm-1波段作为松乳菇子实体可溶性多糖的特征波段,选择800～1700 cm-1波段作为松乳菇子实体可溶性蛋白质的特征波段,对光谱数据进行“7点平滑+二阶导数+多元散射校正+标准正态变量变换”的预处理,建立了松乳菇可溶性多糖与可溶性蛋白质的PLS含量预测模型,可溶性多糖含量预测模型的训练集相关系数R~2为0.86729,训练集均方根误差RMSEE为4.9194,验证集的相关系数R~2为0.9612,验证均方根误差RMSEP为2.6776。可溶性蛋白质含量预测模型的训练集相关系数R~2为0.88625,训练集均方根误差RMSEE为3.3323,验证集的相关系数R~2为0.8651,验证均方根误差RMSEP为3.6804。两个模型的相关系数R~2均接近1,RMSEE值均较小,模型均没有过拟合现象,建模效果良好。
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