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目的：本课题拟利用血管内皮细胞体外模型以及临床样本,研究在高糖环境下内皮细胞中出现表达差异的miRNA-21,并利用多种细胞分子生物学技术方法,研究这些miRNA-21(?)勺生物学功能,从而初步阐释niRNA-21在高糖环境下调控内皮细胞生理活动的分子机制。方法：所有入院患者在行选择性冠状动脉造影时均使用Seldinger穿刺法穿刺股动脉,置入6F/7F鞘管,在鞘管末端三通处先抽血约2ml弃去不要,再抽取10ml血液样本于抗凝常规管中,采用免疫磁珠法(内含Beads直标的anti-CD34抗体)分离血液样本中的游离内皮细胞放-80℃冻存；用浓度为30mM的葡萄糖处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24小时后放-80℃冻存,用RT-PCR方法检测细胞中miRNA-21的表达量。用脂质体LipofectamineTM2000将miRNA-21抑制剂2’OMe-miRNA-21转染到DMEM培养基孵育的HUVECs中,高糖处理48小时,收集细胞进行双向电泳分析,通过质谱鉴定鉴定出差异蛋白,Western-blot法验证差异蛋白的表达水平。结果：1、CHD组与对照组比较,有吸烟史的比例及年龄、体重、同型半胱氨酸、microRNA-21明显高于对照组,两者间比较差异有统计学差异(P<0.05)2、四组间在年龄、吸烟史、同型半胱氨酸、miR-21的比较均有统计学差异(P<0.05)3、体外培养的脐静脉内皮细胞中的miR-21在高糖处理后显著上调(P<0.05)。4、通过对HUVECs进行双向电泳共鉴定得到差异表达的蛋白31个。其中在anti-miR-21组中上调13个,下调18个,其中4个蛋白具有最为显著的差异,5、质谱鉴定为分别是膜联蛋白A2(ANNEXIN A2), S100A4,线粒体超氧化物歧化酶(SOD2),硫氧还蛋白(Thioredoxin)6、通过western-blot对差异蛋白进行表达验证, ANNEXIN A2, S100A4, SOD2, Thioredoxin均在anti-miR-21组中下调。结论：1、冠心病患者较非冠心病者血管内皮细胞中的miRNA-21表达水平明显上调。2、血管内皮细胞中的miRNA-21在高糖处理后显著上调。3、miRNA-21下调可引起ANNEXIN A2, S100A4, SOD2, Thioredoxin的下调。