先天性巨结肠(Hirschsprung’s disease，HD)是小儿肠梗阻的常见病因，目前其肠管运动障碍的病理生理机制尚未明确。Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal，ICCs)是分布在胃肠道神经末梢与平滑肌之间的一类特殊细胞，它们通过缝隙连接彼此相连，被认为是肠道平滑肌运动的起搏点及协调者。在胃肠道c-kit免疫组化染色方法标记ICCs具有特异性，而Connexin43是人类最重要的缝隙连接蛋白。 目的 本研究应用抗c-kit和抗Connexin43双标免疫组化方法观察ICCs和Connexin43在HD痉孪段、移行段及扩张段肠管中的分布状态及ICCs的连接方式，以探讨HD的发病机制。 资料方法 本组11例HD手术标本，均经组织学检查证实诊断。患儿年龄5月—2.5岁，男8例，女3例。常见型9例，长段型2例。均行经肛门soave巨结肠根治术。对每例取痉挛段、移行段及扩张段系膜侧全层肠壁组织，常规石蜡包埋、切片，采用SABC双标免疫组化染色。以扩张段近端肠管做自身对照。光镜下观察以及计数ICCs数目，对HD扩张段与痉挛段的肌间神经丛内和环肌内的ICCs数目进行统计学分析。 结果ICCs分布在环肌内和肌间神经丛区，呈纺锤形，沿其纵轴有2个长的主要突起，细胞核较大，胞浆内可见紫蓝色颗粒样物质。环肌内的ICCs位于肌间隔内，与平滑肌细胞紧贴，并与平滑肌纤维平行走行。ICCs在HD的有神经节细胞段肠管与无神经节细胞段肠管分布不同，在HD的扩张段(即有神经节细胞段)：ICCs大量分布在环肌内，此区域ICCs很丰富，形成网络状结构；肌间神经丛区也分布大量ICCs，主要分布在神经丛周边，与周围界限明显。在HD痉挛段(即无神经节细胞段)：环肌内ICCs明显减少甚至缺如，仅肌间神经丛区域有少许ICCs，ICCs彼此间距离远，连接不明显，对每一例HD扩张段与痉挛段环肌内和肌间神经丛中的ICCs数目进行比较，发现HD无神经节细胞肠管ICCs数目明显减少，差异具有显著性意义(p<0 .001)。抗Co皿e石n43阳性表达呈鲜红色颗粒状，主要分布在以下三个部位:(l)、主要在ICCs的胞体及突起上;(2)、在环、纵肌内，主要在环肌内和环肌外侧缘，在两相邻肌细胞的胞膜接触处和其两侧的胞浆内，呈红色细丝状及小的点片状;(3)、大量分布在环、纵肌之间的肌间神经丛区。在HD的有神经节细胞肠管:上述区域均可见Connexin43明显的表达，Con-ne石n43阳性表达的强弱和分布与ICCs分布具有一致性。在HD的无神经节细胞肠管:在环肌内和肌间神经丛区残存的ICCs上Connexin43阳性表达明显减弱甚至丧失;在环、纵肌的肌纤维间仍可见Connexin43表达，但减弱;在肌间神经丛区Colmexin43也明显减弱甚至消失。结论 本研究证实与神经节细胞缺如一样，病变肠管缺少ICCs是HD病理改变之一。HD病变肠管不仅Cajal间质细胞减少，而且存在缝隙连接蛋白Connexin43表达异常，ICCs彼此及与平滑肌细胞形成缝隙连接。ICCs和Connexin43分布异常必将导致肠管慢波节律和兴奋传导异常，从而引起或加重HD发病，而肠管中残存IcCs的数量和功能可能与HD临床症状轻重有一定关系。