论文部分内容阅读
背景和目的 放射治疗是目前临床上治疗肿瘤常用的治疗手段，然而各种肿瘤甚至患有同一种肿瘤的不同病人其疗效却大有差异。影响放射治疗效果的因素很多，其中肿瘤细胞内在的放射敏感性是关键因素之一。据世界卫生组织的粗略估计，世界上80％左右的鼻咽癌发生在我国，广东最为常见。放射治疗是鼻咽癌的主要治疗手段，但临床上，病理分型和临床分期相同、在进行同一剂量及方式治疗时，患者却有着不同的放射敏感性和放疗效果，虽然其影响因素是多方面的，但肿瘤细胞的增殖活性和细胞凋亡无疑是影响肿瘤细胞放射敏感性的重要因素。如能寻找到与鼻咽癌放射敏感性相关的细胞增殖凋亡的生物标志，则可在放疗前预先测知其敏感性的高低，从而有针对性改进治疗方案，提高各个病人的疗效。本研究通过探讨细胞增殖的生物标志PCNA、P53蛋白、DNA含量和MI以及细胞凋亡的生物标志SAI、Bcl-2和Bax蛋白与鼻咽癌放射敏感性的关系，期望找到预测鼻咽癌放射敏感性的生物学标志。方法.研究对象:选择1997年5月一2001年12月期间汕头大学医学院病理科收检的51例放疗前鼻咽癌组织标本。2.组织学切片HE染色:作病理组织学诊断和Ml计数。3.免疫组织化学方法:EnVISion法检测51例放疗前鼻咽癌组织中PCNA、P53、Bel一2及Bax蛋白的表达。4.TUNEL法:检测放疗前鼻咽癌组织中自发性细胞凋亡程度，以自发性凋亡指数(SAI)表示。5.图像分析法:检测鼻咽癌DNA含量和细胞核的形态定量参 结果狄病理组织学诊断:按WHo(1 991)标准分型，51例鼻咽癌中，角化型鳞状细胞癌3例，分化型非角化性癌30例，未分化型癌18例。2.细胞增殖指标检测(l)PCNA和P53蛋白表达:51例鼻咽癌组织中PCNA和P53蛋白表达阳性者分别有50例(98.0%)和46例(90.2%)，高表达者分别有16例(31.4%)和22例(43.1%);鼻咽癌组织中PCNA表达与P53蛋白表达呈显著相关关系(尸<0.01): PCNA和P53蛋白表达在角化型鳞状细胞癌、分化型非角化性癌和未分化型癌组织类型之间均无显著性差异:PCNA和P53蛋白表达在T分期之间、N分期之间及H期、111期、lV期之间均无显著性差异;PCNA和P53蛋白的阳性表达水平越高，则鼻咽癌对放射治疗越敏感，放疗后鼻咽局部癌肿完全消退率越高(尸<0.05);PCNA和P53蛋白同时高表达者比单一指标高表达者，其放射敏感性更高(尸<0.05)。用卡方分析法和Kaplan一Meier法作3年生存率的比较均未显示PCNA和P53蛋白的高表达与低表达之间有显著性差异。 (2)DNA含量和细胞核形态参数检测:51鼻咽癌中，完全消退组36例Dl为2.16士0.40，残留组15例Dl为 1.70士0.20，两组有高度显著性差异(尸<0.01)。完全消退组DNA异倍体细胞所占百分率比残留组高(尸<0.01)。鼻咽癌完全消退组细胞核形态参数中面积、周长及直径高于残留组，有显著性差异(尸<0.05)。 (3)Ml计数:51鼻咽癌中，完全消退组36例Ml为3.11士2.05，残留组15例Ml为1.95士1.23，两组有显著性差异(尸<0.05)。 (4)细胞增殖指标之间的相关性分析:在PCNA、P53、Dl和MI4指标中，除P53与Dl和Ml无明显相关性外，其他指标之间均存在明显的相关性。3.细胞凋亡指标检测 (l)自发性凋亡指数(SAI):51鼻咽癌中，完全消退组36例SAI平均为37.17士36.19，残留组15例SAI平均为16.84土22.35，两组有显著性差异(尸<0.05)。 (2)Bel一2和Bax蛋白表达:51例鼻咽癌组织中Bel一2和Bax蛋白表达阳性者均为47例(92.2%);Bd一2蛋白高表达者26例(51 .0%)，Bax蛋白高表达者25例(49.0%);鼻咽癌组织中Bd一2和Bax蛋白，习，.臼肉甲嗯叫‘.守叮爪鸣二闷..‘‘-一.二“曰州卜丙目..，归卜-一~”勺臼~~，，....州，.~月.川，一..，，一臼户...~闷一一一~一朋.户朋‘‘~~.岛鲜叫拼卜.一目.~不产俐淤阳..，.州..，.一~~一一的表达强度呈显著相关关系(P<0.05);Bd一2和Bax蛋白表达在角化型鳞状细胞癌，分化型非角化性癌和未分化型癌组织类型之间均无显著性差异;Bd一2和Bax蛋白表达在T分期之间、N分期之间及H期、111期、W期之间均无显著性差异;鼻咽癌组织SAI与Bcl一2和Bax蛋白自身表达无明显相关性，但与Bcl一2旧ax比率呈负相关;Bd一2蛋白的表达与鼻咽癌放射敏感性呈负相关(尸<0.05)，而Bax蛋白的表达与鼻咽癌放射敏感性无关(P>O.05);Bcl一2旧ax的比率与鼻咽癌放射敏感性呈负相关(尸<0.05)。用卡方分析法和Kaplan一Meier法作3年生存率的比较均未显示Bcl一2和Bax蛋白的高表达与低表达之间有显著性差异。 结论1细胞增殖的生物学标志PCNA、P53蛋白、DNA含量、Ml和癌细胞核形态定量指标是反映鼻咽癌放射敏感性和预测鼻咽癌近期疗效的重要指标。2.PCNA和P53蛋白对鼻咽癌放射敏感性有协同作用，双指标的综合评价比单一增殖指标更有意义。3.细胞凋亡的生物学标志SAI、Bol一2和Bd一2忍ax的比率是反映鼻咽癌放射敏感性和预测鼻咽癌近期疗效的重要指标，而Bax蛋白不能单独作为判断鼻咽癌放射敏感性的指标。4.PCNA、P53、Bel一2和Bax蛋白的表达与病理分型、I陆床分期和生存情况均无关，以上四