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目的分析重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)前、后外周血自然杀伤(NK)细胞及其亚群占外周血淋巴细胞百分比、功能变化及其与造血功能相关性,探讨NK细胞在SAA发病机制中的作用。方法用单克隆抗体四标法和流式细胞术(FCM)检测42例SAA患者[初治12例(初治组)、IST后恢复30例(恢复组)]外周血NK细胞(CD3CD56+/CD16+)及其亚群[CD56bright (CD3"CD56brightCD16neg/dim)、CD56dim (CD3-CD56dimCD16bnght)、CD3-CD56negCD16bright]占淋巴细胞的百分比、NK细胞胞膜抑制性受体(CD158a和CD158b)、NK细胞胞膜活化性受体(NKG2D和NKp46)及NK细胞胞浆穿孔素、颗粒酶B的表达,并与13名正常对照(对照组)做比较。分析上述变化与SAA患者外周血中性粒细胞百分比(ANC%)、淋巴细胞百分比(Lym%)、网织红细胞计数(Ret)及骨髓造血功能(增生程度、粒系百分比、红系百分比、巨核细胞数量、淋系百分比)的相关性。结果1.SAA患者外周血NK细胞及其亚群占淋巴细胞百分比的变化①SAA患者NK细胞百分比的变化初治组、恢复组、对照组NK细胞百分比分别为(10.30±6.08)%、(16.47±8.29)%、(19.45±6.88)%,初治组明显低于恢复组和对照组(均p<0.05),恢复组与对照组比较差异无统计学意义(p>0.05)②SAA患者CD56bnghtNK细胞亚群百分比的变化初治组、恢复组、对照组CD56bnght细胞亚群百分比的中位数分别为0.11%、0.68%、0.53%,初治组明显低于恢复组和对照组组(均p<0.05),恢复组与对照组比较差异无统计学意义(p>0.05)。③SAA患者CD56dim NK细胞亚群百分比的变化初治组、恢复组、对照组CD56dim NK细胞亚群百分比分别为(9.62±6.04)%、(13.81±7.52)%、(18.21±7.16)%,初治组明显低于对照组(p<0.05),初治组与恢复组比较差异无统计学意义(p>0.05),恢复组与对照组比较差异亦无统计学意义(p>0.05)。④SAA患者CD3-CD56negCD16bright NK细胞亚群百分比的变化初治组、恢复组、对照组CD3-CD56negCD16bright NK细胞亚群百分比的中位数分别为0.37%、0.79%、0.41%,恢复组明显高于初治组及对照组(均p<0.05),初治组与对照组比较差异无统计学意义(p>0.05)。2.SAA患者外周血NK细胞功能的变化①SAA患者NK细胞胞膜受体表达的变化SAA初治组NK细胞胞膜CD158a、NKG2D、NKp46中位表达阳性率分别为16.45%、95.68%、88.23%,SAA恢复组为19.34%、96.85%、82.97%,对照组为21.59%、96.13%、40.99%,初治组与恢复组NKp46表达阳性率明显高于对照组(均p<0.05)；初治组、恢复组、对照组NK细胞胞膜CD158b表达阳性率分别为(34.66±16.02)%、(39.13±17.75)%、(41.43±17.43)%,各组之间比较差异均无统计学意义(均p>0.05)。②SAA患者NK细胞胞浆穿孔素、颗粒酶B表达的变化初治组、恢复组、对照组NK细胞胞浆穿孔素表达阳性率分别为(64.97±21.61)%、(66.14±20.73)%、(42.11±27.25)%,初治组与恢复组均明显高于对照组(均p<0.05),初治组与恢复组比较差异无统计学意义(p>0.05)；初治组、恢复组、对照组NK细胞胞浆颗粒酶B表达的中位阳性率分别为96.43%、96.97%、92.88%,各组之间比较差异均无统计学意义(均p>0.05)。3.SAA患者外周血NK细胞及亚群占淋巴细胞百分比、功能与造血功能的相关性①SAA患者NK细胞及其亚群百分比与造血功能的相关性NK细胞百分比与SAA患者ANC%、骨髓增生程度、骨髓粒系及红系百分比呈正相关(r分别为0.423、0.455、0.357、0.340,均p<0.05),与Lymm%、骨髓淋系百分比呈负相关(r分别为-0.411、-0.522,均p<0.05)；CD56brightNK细胞亚群百分比与SAA患者ANC%、骨髓增生程度、骨髓的粒系百分比及巨核细胞数量呈关正相关(r分别为0.609、0.412、0.517、0.362,均p<0.05),与骨髓淋系百分比呈负相关(r=-0.435,p＜0.05); CD56dimNK细胞亚群百分比与SAA患者骨髓增生程度呈正相关(r=0.404,p<0.05),与骨髓淋系百分比呈负相关(r=-0.411,p<0.05)；CD3-CD56negCD16bright NK细胞亚群百分比与SAA患者ANC%、Ret、骨髓增生程度、骨髓粒系百分比呈正相关(r分别为0.468、0.328、0.451、0.434,均p<0.05),与Lymm%、骨髓淋系百分比呈负相关(r分别为-0.389、-0.547,均p<0.05)。②SAA患者NK细胞功能与造血功能的相关性NK细胞的CD158a、CD158b、NKG2D、NKp46、穿孔素、颗粒酶B表达与前述各造血功能指标均无相关性(均p>0.05)。结论SAA患者外周血NK细胞、CD56brigt、CD56dimNK细胞亚群占淋巴细胞百分比降低可能引起患者免疫耐受被破坏、T细胞功能亢进而导致造血功能衰竭；SAA患者外周血NK细胞NKp46、穿孔素表达增强可能是对NK细胞数量不足的一种“代偿”。