糖尿病大鼠海马神经元的形态学研究

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目的 ①观察糖尿病大鼠海马内神经元的光镜结构和超微结构改变;②观察糖尿病大鼠海马神经元内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)、神经营养因子3(neurotrophin-3, NT-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (B-cell lymphoma/leudemia 2, Bcl-2)及Bax表达的变化;③观察胰岛素治疗对糖尿病大鼠海马神经元内iNOS、NT-3、Bcl-2及Bax表达变化的影响;④探讨高血糖对海马神经元形态结构及功能的影响及作用机理;探讨iNOS、NT-3、Bcl-2及Bax在糖尿病及糖尿病脑病形成过程中的可能作用及意义;探讨胰岛素对糖尿病大鼠海马内神经元结构及功能的表达的影响及机理。方法 将30只SD雄性大鼠随机分为对照组1个月和3个月、糖尿病组1个月和3个月及胰岛素治疗组1个月和3个月共6组,腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,分别于第1月及第3月末测体重与血糖值,并取海马制成超薄切片置透射电镜下观察超微结构变化,制成石蜡切片行HE、Nissal染色和免疫组化SABC法染色于光镜下观察一般组织学、尼氏体及iNOS、NT-3、Bcl-2及Bax表达的变化。应用计算机图像分析系统对免疫组化结果进行定量分析,比较6组海马各区平均光密度值,用SPSS10.0软件统计分析实验结果。结果①与对照组体重(305.50±34.67)g和血糖(7.23±0.84)mmol/L比较,糖尿病1个月组体重(229.83±55.44)g减轻、血糖(23.31±6.81)mmol/L升高,差异具有显著性(P<0.01),胰岛素治疗1个月组体重(354.67±31.94)g及血糖(6.44±1.21)mmol/L无显著性差异(P>0.05)。②在HE染色切片中,可见对照组大鼠海马皮质由分子层、锥体细胞层和多形细胞层构成,锥体细胞层中以锥体细胞为主。齿状回由分子层、颗粒细胞层和多形细胞层构成,其中颗粒细胞层主要由数层紧密排列的颗粒细胞构成。光镜下糖尿病组及胰岛素治疗组大鼠海马结构未见明显变化。③在Nissal染色切片中,对照组、糖尿病组和胰岛素治疗组间尼氏体的数量及染色无明显的差异。④电镜下,与对照组相比,糖尿病3个月组大鼠海马内神经元超微结构出现一
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