目的:血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)是血管内皮细胞特异性的促有丝分裂原,在多种组织(如骨骼肌、心肌、脑等)缺血性疾病均可以促进新生血管的形成及减少神经细胞的凋亡,但是VEGF蛋白合成的成本很高且在体内不稳定,极易被降解,必须重复给药,使其临床应用受限。随着基因工程技术和分子生物学的发展,通过载体将VEGF基因转到缺血组织,使其在体内一段时间内持续表达VEGF蛋白从而达到治疗作用,已经在治疗外周梗塞性血管病及心肌缺血中获得成功,但是由于脑组织的特殊性,载体选择和给药途径的限制,VEGF基因治疗脑缺氧损伤的研究一直少见报道。本实验观察将VEGF基因通过pcDNA3.1/rVEGF120真核表达载体转导至缺氧缺血性脑损伤大鼠脑组织后细胞凋亡情况及凋亡相关基因bax、bcl-2、fas蛋白的表达情况,探讨VEGF基因对细胞凋亡的影响和可能机制。方法:实验组7日龄SD大鼠42只,通过夹闭双侧颈总动脉60分钟同时8%氧浓度低氧2小时制备新生大鼠缺氧缺血再灌注脑损伤模型后,随机分为2组,VEGF基因治疗组和空载质粒对照组,将构建的pcDNA3.1/rVEGF120真核表达载体导入VEGF基因治疗组大鼠脑内(100μg/只),空载质粒对照组给与空载的pcDNA3.1真核表达载体(100μg/只),另设正常对照组和假手术对照组各5只。实验组动物分<WP=5>别在6、12、24、48、72小时和7天、14天断头处死脑组织于4%多聚甲醛中固定后制备石蜡切片后行免疫组化染色,观察VEGF及凋亡相关基因bcl-2、bax及fas蛋白表达的影响,通过Hoechst染色观察脑组织中细胞凋亡数。结果:转基因后的免疫组化染色结果显示:VEGF蛋白表达从第三天开始,逐渐增强,持续到14天仍有很强表达;转基因后脑细胞凋亡数减少;bcl-2、bax、fas基因蛋白的表达一般从脑缺氧缺血再灌注损伤后24小时开始可以检测到,至72小时后检测不到;相比对照组,治疗组促凋亡基因fas、bax的表达减少,抗凋亡基因bcl-2的表达增加。 结论:转染VEGF基因后能够减少脑细胞凋亡,可能通过调节抗凋亡基因及促凋亡基因表达有关的分子机制从而对缺氧缺血再灌注脑损伤发挥保护治疗作用。