【摘 要】
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深色有隔内生真菌(Dark Septate Endophytes,DSE)是一类普遍定殖于植物根部、能改善植物营养、增强植物抗逆性等多功能的内生真菌。项目组前期研究结果表明DSE能够促进玉米对
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深色有隔内生真菌(Dark Septate Endophytes,DSE)是一类普遍定殖于植物根部、能改善植物营养、增强植物抗逆性等多功能的内生真菌。项目组前期研究结果表明DSE能够促进玉米对难溶性磷的利用,但其机制却不清楚。解磷细菌(Phosphate-solubilizing bacteria,PSB)可以活化土壤中难溶性无机磷和有机磷。但在植物根际普遍共存的DSE-解磷细菌对土壤中植物不能直接利用的难溶性磷的活化和植物磷养分的改善作用尚未见报道。本论文拟以分离自田间玉米根际土中具有解磷功能的解磷细菌为材料,对这些细菌在离体培养条件下的解磷能力进行评估,从中筛选解磷能力较强的细菌,并从形态学和分子水平对其进行鉴定。在此基础上,将解磷能力较强的细菌和DSE进行双接种玉米,在限制可溶性磷(Pi)、同时在基质中加入难溶性有机磷(植酸钙)条件下进行盆栽试验,研究解磷细菌和DSE对玉米磷利用的影响。论文取得的主要结果如下:1.对深色有隔内生真菌(DSE)嗜鱼外瓶霉(Exophiala pisciphila,H93)菌株进行解磷能力的评估,通过发酵液中可溶性P含量的测定可知H93对植酸钙具有一定的溶解能力,其可溶性P含量为414 μg L-1,与未接种H93处理相比,提高了50.24%。从酶活检测结果可知,发酵液中的酸性磷酸酶活性比碱性磷酸酶活性高,且酸性磷酸酶活性是碱性磷酸酶活性的5.35倍。同时菌丝在利用难溶性磷的过程中,还可以降低环境的pH值,从而将磷从难溶态转换成可溶态,菌丝生长得到促进。2.以植酸钙(Phytin)为单一磷源的培养基对田间玉米根际土进行了解磷细菌的分离和筛选,从中筛选出1株具有高效溶解有机磷能力的菌株,摇瓶培养试验发现其最大可溶性磷含量为629.67 μg L-1。经过对该菌株进行形态特征观察和16S rDNA序列测定,鉴定其为假单胞菌(Pseudomonas sp.),菌株编号为BP01。酶活检测结果表明,该菌株发酵液中具有较高的酸性磷酸酶活性,其酶活达到82.62 EU。3.玉米盆栽接种试验结果表明,在植物-DSE-解磷细菌组合中,玉米全株干重、地茎和植株全磷浓度均高于对照组或单接种处理;玉米栽培基质检测结果表明,与对照组相比,双接种处理组中可溶性磷含量、酸性磷酸酶活性、碱性磷酸酶活性、植酸酶活性分别提高了 38.17%、39.38%、22.47%、63.04%,同时还显著降低了基质中的pH值,双接种处理能活化土壤中的难溶性磷,将其变为植物能够吸收利用的可溶态磷,从而促进了植物对磷的吸收,提高了植物的生物量、植株的总磷含量、基质的酶活等,并降低了环境的pH值。
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