sirt1激活剂细胞筛选模型建立及初步应用

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天然药物在中国有着悠久的历史,天然药物以其来源广泛,作用温和,一直以来被广泛使用。随着近些年来天然药物提取分离纯化技术的发展,获得了很多具有良好效果的单体化合物。据报道sirt1基因在一些能量代谢类疾病中起到重要作用,例如糖尿病,肝脏疾病等。因此以sirt1基因作为靶点进行药物筛选,有希望得到一些能够对这类疾病具有治疗效果的药物。天然药物的水提取物是天然药物最常使用的药用成分,因此本实验采用对所选取的天然药物的水提取物作为药物筛选库。近些年随着至对荧光素酶的研究深入,发现其不仅仅能够作为细胞或者分子的标记物进行细胞追踪和活体成像,同样也可以应用于药物高通量筛选,通过建立特异性目的靶标的报告基因载体,通过双荧光素酶报告基因系统,能够快速的从小分子化合物库中筛选出所需的分子。由于其灵敏度高,特异性强,操作简单,可高通量性,得到越来越广泛的应用。本实验运用双荧光素酶检测方法,将sirt1启动子克隆入报告基因荧光素酶启动子区域,通过瞬间转染细胞后给药刺激,检测荧光素酶活性的方法。建立一个sirt1激活剂细胞筛选模型,以所选天然药物水提取物作为筛选药物库,进行sirt1激活剂进行筛选,希望获得若干sirt1激活剂,为这类能量代谢疾病寻找新的治疗方法。
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