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猪囊尾蚴能够引起猪和人的囊虫病,影响养猪业的发展和人类的健康。组织蛋白酶B是半胱氨酸蛋白酶家族成员,在寄生虫的营养、生长发育、组织迁移、蛋白加工和活化以及免疫逃避等方面发挥重要作用,是预防及治疗多种寄生虫疾病的潜在的药物靶标和疫苗候选分子。本文对猪带绦虫组织蛋白酶B基因进行了克隆、表达及功能的初步研究。取得了以下结果:1.以猪带绦虫的c DNA为模板,成功地扩增了猪带绦虫组织蛋白酶B基因(Tscp B)。利用生物信息学工具,对该序列进行分析。结果表明该基因ORF大小为1074 bp,编码357个氨基酸,理论分子质量为39.27 ku,具有组织蛋白酶B的特征结构域。Real-time PCR结果表明,组织蛋白酶B基因在成虫期表达量显著高于囊尾蚴时期。2.构建了原核表达重组质粒p ET30a-Tscp B,经诱导表达,获得了以包涵体形式存在的重组蛋白r Tscp B,分子大小约为38 ku。Western blotting分析表明,r Tscp B能被猪囊尾蚴病阳性血清特异性识别。用纯化后的r Tscp B免疫家兔,4次免疫后产生了特异性的高滴度Ig G抗体。免疫组化结果表明,r Tscp B主要表达于成虫的体壁及生殖器官,证明猪带绦虫组织蛋白酶B可能与虫体摄取营养以及生殖发育有关。3.构建了毕赤酵母真核表达重组质粒p PIC9K-Tscp B。明胶酶谱实验证明y Tscp B具有水解活性,且能够降解荧光底物Z-Phe-Arg-AMC,最适p H为5.5。y Tscp B还能降解猪Ig G、BSA、纤连蛋白等大分子。y Tscp B的水解活性能被E-64特异性抑制。底物实验表明猪带绦虫组织蛋白酶B可能在摄取营养、入侵宿主等方面发挥作用。4.利用同源模建的方法预测了猪带绦虫组织蛋白酶B蛋白的结构,利用分子对接的方法预测了组织蛋白酶B蛋白与抑制剂E-64之间相互作用的模式。