【摘 要】
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第一部分碱烧伤角膜新生血管动物模型的构建目的:利用碱烧伤制作炎症性角膜新生血管动物模型。材料与方法:2-3Kg成年新西兰大白兔12只,雌雄均等,随机分为3组,每组4只,以左眼为实验眼,采用浸润1mol/L Na OH直径为8mm的滤纸片碱烧伤方法制作炎症性角膜新生血管动物模型,碱烧伤时间A组30s,B组20s,C组10s。碱烧伤后第1、4、7、14天角膜拍照,计算角膜新生血管面积,第14天角膜共聚
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第一部分碱烧伤角膜新生血管动物模型的构建目的:利用碱烧伤制作炎症性角膜新生血管动物模型。材料与方法:2-3Kg成年新西兰大白兔12只,雌雄均等,随机分为3组,每组4只,以左眼为实验眼,采用浸润1mol/L Na OH直径为8mm的滤纸片碱烧伤方法制作炎症性角膜新生血管动物模型,碱烧伤时间A组30s,B组20s,C组10s。碱烧伤后第1、4、7、14天角膜拍照,计算角膜新生血管面积,第14天角膜共聚焦显微镜（HRT3）下观察角膜新生血管生长及角膜组织情况,取角膜组织做HE染色切片。结果:碱烧伤30s组碱烧伤后第4天出现新生血管芽,新生血管面积4.35±1.25mm2,第7天新生血管呈毛刷状,角巩膜缘全周生长,新生血管面积22.3±17.89mm2,第14天新生血管面积57.72±19.87mm2;碱烧伤20s组,碱烧伤后第5天出现新生血管芽,第7天新生血管局部生长,新生血管面积10.7±7.47mm2,第14天新生血管面积35.46±16.56mm2,术后第7天、14天新生血管面积小于30s组（P＜0.05）,差异有统计学意义;碱烧伤10s组未出现角膜新生血管。角膜共聚焦显微镜下见角膜基质内新生血管以及大量炎症细胞,基质细胞呈激活状态,碱烧伤区域见坏死组织,基底层上皮细胞增生。结论:1mol/L Na OH烧灼角膜30s能够诱发炎症性角膜新生血管的生长,无角膜穿孔及角膜溃疡发生,角膜新生血管沿角巩膜缘全周向角膜中央碱烧伤区域生长。第二部分康柏西普对炎症性角膜新生血管的作用目的:观察康柏西普对碱烧伤诱导角膜新生血管的作用。材料与方法:2-3kg成年新西兰大白兔44只,雌雄均等,随机分为5组,实验组（A组9只）,阳性对照组（B组9只）,阴性对照组（C组9只）,空白对照组（D组9只）,正常对照组（E组8只）。以左眼为实验眼,采用碱烧伤方法制作炎症性角膜新生血管动物模型,直径8mm的滤纸片浸1mol/L Na OH,放入角膜中央烧灼30s。碱烧伤后第1天,A组球结膜下注射康柏西0.1ml/1mg,B组雷珠单抗0.1ml/1mg,C组0.1ml0.9%氯化钠溶液,D组碱烧伤后不做任何处理,E组为正常对照组,即不做碱烧伤,球结膜下也不注射药物。分别于碱烧伤后第4、7、14、21天计算角膜新生血管面积,每组处死一定数量动物,抽取房水,检测VEGF,取角膜组织,做HE染色切片,免疫组织化学检查,标记新生血管（CD-31）以及新生淋巴管（LYVE-1）。结果:碱烧伤后第14天、21天A、B两组炎症浸润程度、血管生长程度低于C、D组（P＜0.05）,而A与B组,C组与D组之间差异无显著性;A组碱烧伤后第7、14天,新生血管面积小于C、D组（P＜0.05）,第14天小于B组（P=0.021）,B组碱烧伤后第7、14天新生血管面积小于C、D组（P＜0.05）,C、D组角膜新生血管面积无差异;碱烧伤后第7、14、21天,A、B组房水中VEGF浓度低于C、D组（P＜0.05）,第14天A组VEGF浓度低于B组（P＜0.05）,C、D组VEGF浓度无显著差异;碱烧伤后第7、14天,A组、B组角膜新生淋巴管计数小于C组、D组（P＜0.05）,A组与B组,C组与D组之间角膜新生淋巴管计数无统计学差异。碱烧伤后角膜新生血管面积与房水中VEGF浓度呈正相关（R=0.744,P=0.001）,碱烧伤后角膜新生淋巴管计数与房水VEGF浓度呈正相关（R=0.632,P=0.027）。结论:碱烧伤后早期球结膜下注射Conbercept与Ranibizumab能有效的抑制角膜新生血管、新生淋巴管,其抑制作用与降低VEGF的浓度密切相关。
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