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纤维素酶具有非常广泛的用途，它在生物乙醇、食品加工、饲料、纺织、中医药等多个领域中都有较为重要的应用。纤维素酶作为降解纤维素和半纤维素的催化剂，在转化木质纤维素为生物乙醇的过程中起着至关重要的作用，因此选育出高产纤维素酶菌株，具有非常重要的科学前景和应用价值。其中，里氏木霉和黑曲霉在生产纤维素酶方面各具优点，因此被广泛研究。 为了进一步提高纤维素酶系中各组分酶活力，本研究对里氏木霉RUT C30进行复合交替诱变，并对突变株的液体产酶培养基进行优化;另外对黑曲霉C112产β-葡萄糖苷酶进行优化，弥补里氏木霉生产的纤维素酶中酶系不足的缺点;最后对纤维素酶活性的环境影响因子及应用效果进行评价，主要获得结果如下: (1)采用紫外照射和甲基磺酸乙酯(EMS)对出发菌株里氏木霉(Trichodermareesei) RUT C30的孢子悬液进行复合交替诱变。通过计算致死率，确定最佳诱变方法为紫外150s和EMS120s重复诱变2次。对诱变后的突变菌株分别进行刚果红平板初筛和液体发酵复筛，得到一株高活性纤维素酶突变菌株ZE7，其滤纸酶活为3.84 IU/mL，相对于原始菌株2.09 IU/mL有显著提高。经过8次连续传代培养研究其稳定性，发现突变菌株酶活性较稳定，平均值为3.74 IU/mL。 (2)通过单因素及响应面实验优化里氏木霉ZE7产酶培养基。研究得到最优产酶条件为:微晶纤维素11.15 g/L，玉米浆1 g/L，硫酸铵5.14 g/L，1 mol/L柠檬酸缓冲液75.83 mL/L。所获得的里氏木霉ZE7滤纸酶活最高为7.79 IU/mL，较优化前提高了1.08倍，β-葡萄糖苷酶活最高为3.45 U/mL，比原有酶活(1.23U/mL)提高了1.80倍。 (3)通过单因素及响应面实验优化黑曲霉C112产酶培养基。研究得到最优产酶条件为:玉米芯27.64 g/L、稻草粉25.18 g/L、硫酸铵0.76 g/L、蛋白胨0.76 g/L、1 mol/L柠檬酸缓冲液为100 mL/L时、产酶6d。所获得的黑曲霉C112β-葡萄糖苷酶活力为15.67 U/mL，较优化前酶活(7.22 U/mL)提高了1.17倍。 (4)对纤维素酶活性的环境影响因子进行分析。结果表明:纤维素酶的最佳反应温度为50℃，且在该温度下酶活性稳定，高温会使酶变性失活。最佳反应pH值为5，在该pH值下酶活性稳定，过酸或过碱都会使酶失活。金属离子Fe2+、Mn2+、Zn2+、Co2+能激活纤维素酶的活性，Fe3+、Hg2+、Al3+、Pb2++、Ag+则会抑制纤维素酶的活性，而Na+、Mg2+、Ba2+、Cu2+、Ca+、K+对纤维素酶的影响不显著。 (5)对纤维素酶的催化效果进行初步评价。将里氏木霉酶液与黑曲霉酶液复合并进行配比优化，通过分析复合酶对杨木的酶解糖化效果，得到最佳酶解条件为:酶用量15 IU/g，β-葡萄糖苷酶/滤纸酶活力的比值1.5，酶解48 h，还原糖含量最高达到48.93 mg/mL。