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1目的通过体内实验,观察黄蒲通窍胶囊（HPTQC）对AD动物模型Ca2+-Ca MKⅣ信号通路的影响,探讨黄蒲通窍胶囊是否具有治疗AD、神经保护的作用,并进一步探讨其可能的作用机制,为后期研究HPTQC做铺垫。2方法150只SD大白鼠适应性喂养7天后,从中取健康雌、雄性大白鼠共96只,随机分为8组:空白组、假手术组、模型组、黄蒲通窍胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组、多奈哌齐组、尼莫地平组。雌雄分开,并用苦味酸标记。通过体内实验,课题组选用长期D-半乳糖腹腔注射加上大鼠两侧海马一次性注射Aβ25-35的方式造模复制AD动物模型,通过Morris水迷宫实验从行为学角度、HE染色观察大鼠海马组织形态学改变从病理学角度来验证模型的成功建立以及黄蒲通窍胶囊对AD大鼠的治疗效果,证实黄蒲通窍胶囊具有治疗AD的作用。建立AD动物模型,运用透射电镜检测黄蒲通窍胶囊对大鼠海马组织微结构的影响和神经元损伤情况,证实黄蒲通窍胶囊对AD动物模型具有神经保护作用。建立AD动物模型,采用Western blot分子生物学方法测定各组大鼠海马中Ca M、Ca MKK、Ca MKⅣ、CREB、tau蛋白、磷酸化tau蛋白的表达水平,证实黄蒲通窍胶囊对AD大鼠海马Ca2+-Ca MKⅣ信号通路及tau蛋白过度磷酸化具有抑制作用,阐述其可能的作用机制。3结果（1）Morris水迷宫实验显示:与空白组相比,假手术组从第1天到第5天逃避潜伏期无显著性差异（P>0.05）;与假手术组相比,模型组从第1天到第5天逃避潜伏期有明显差异性,具有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊高中低剂量组、多奈哌齐组、尼莫地平组第1天逃避潜伏期无差异性,不具有统计学意义（P>0.05）,随着训练天数的增加,各治疗组大鼠逃避潜伏期均显现出不同程度缩短的趋势。与模型组相比,多奈哌齐、黄蒲中剂量组从第2天开始,潜伏期开始出现差异性（P<0.05）,第3～5天差异性明显（P<0.01）;与模型组相比,尼莫地平、黄蒲高剂量组大鼠于第3日逃避潜伏期差异开始出现统计学意义（P<0.05）,于第4～5日两者之间差异显著（P<0.01）;与模型组相比,黄蒲低剂量组于第4日逃避潜伏期开始出现统计学差异（P<0.05）。（2）HE染色结果显示:假手术组大鼠海马CA3区锥体细胞呈现多层、整齐、紧密排列,并且细胞分布均匀、外形规则、结构清晰,细胞质均质红染,细胞核圆而大、位置居中,核仁明显、清晰。与假手术组相比较,模型组大鼠海马CA3区锥体细胞数量稀疏、排列紊乱,锥体细胞胞体收缩变形,呈不规则形,胞浆浓缩,胞核固缩深染、边缘化,核仁模糊不清。多奈哌齐、尼莫地平组及黄蒲通窍胶囊治疗组大鼠海马CA3区病理形态有显著的改善,锥体细胞数量略微减少,排列比较规则,仅有个别细胞胞核固缩、深染,细胞形态结构基本接近正常。（3）电镜超微结构结果显示:假手术神经元数量较模型组明显增多,胞浆中细胞器丰富,有较多线粒体,脊清晰可见,核膜完整,呈双层分布,可见核孔,染色质分布均匀。模型组粗面内质网扩张明显,线粒体变性,嵴部分断裂,核染色质分布尚均匀,核膜完整。中剂量治疗组可见大量微管,核糖体密度均匀,线粒体丰富,核染色质深浅均匀分布。多奈哌齐组神经元胞浆细胞器较多,存在两个溶酶体,核糖体较多,少数线粒体嵴断裂。尼莫地平组神经元中细胞器数量较模型组明显增多,核膜完整,核染色质分布均匀,少数线粒体空泡变性。（4）WB检测结果显示:与假手术组相比,模型组Ca M蛋白表达增加不明显（P>0.05）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊治疗组、多奈哌齐组、尼莫地平组Ca M蛋白表达明显减少（P<0.05）。与假手术组相比,模型组Ca MKK蛋白表达增加明显（P<0.05）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊治疗组、多奈哌齐组、尼莫地平组Ca MK蛋白表达明显减少（P<0.05）。与假手术组相比,模型组Ca MKⅣ蛋白表达增加明显（P<0.05）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊治疗组、多奈哌齐组、尼莫地平组Ca MKⅣ蛋白表达减少明显（P<0.05）。与假手术组相比,模型组CREB蛋白表达增加明显（P<0.05）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊治疗组CREB蛋白表达减少不明显（P>0.05）,多奈哌齐组、尼莫地平组CREB蛋白表达明显减少（P<0.05）。与假手术组相比,模型组tau蛋白表达增加明显（P<0.05）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊治疗组、多奈哌齐组、尼莫地平组tau蛋白表达明显减少（P<0.05）。与假手术组相比,模型组磷酸化tau蛋白表达增加明显（P<0.05）;与模型组相比,黄蒲通窍胶囊治疗组、多奈哌齐组磷酸化tau蛋白表达明显减少（P<0.05）,尼莫地平组减少不明显（P>0.05）。4结论（1）黄蒲通窍胶囊可明显改善AD大鼠的学习记忆能力;（2）黄蒲通窍胶囊可减轻AD大鼠海马组织神经元的损伤;（3）黄蒲通窍胶囊可能通过调节海马组织Ca2+-Ca MKⅣ信号通路起到治疗AD的作用。