【摘 要】
：
目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是以认知损害为主要症状的中枢神经系统退行性疾病。现有的临床药物只能改善疾病症状,缓解疾病进展,但尚无药物能够完全治愈AD。随着AD患者人数逐年增加,探索新的治疗策略变得更为重要。β-淀粉样蛋白（Amyloid proteinβ,Aβ）沉积导致的神经元损伤是AD中重要的病理机制。用Aβ1-42孵育的神经元建立体外细胞模型,研究AD中的
【基金项目】
：
国家自然基金（No.81871104）；
论文部分内容阅读
目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是以认知损害为主要症状的中枢神经系统退行性疾病。现有的临床药物只能改善疾病症状,缓解疾病进展,但尚无药物能够完全治愈AD。随着AD患者人数逐年增加,探索新的治疗策略变得更为重要。β-淀粉样蛋白（Amyloid proteinβ,Aβ）沉积导致的神经元损伤是AD中重要的病理机制。用Aβ1-42孵育的神经元建立体外细胞模型,研究AD中的神经元损伤机制,对探索AD的治疗方法具有重要意义。ZEB1是E盒结合锌指蛋白转录因子家族中的一员,参与细胞分化、凋亡等多种生物学过程。但其对AD中神经元损伤的影响尚未见报道。长链非编码RNA（long noncodingRNA,LncRNA）是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA,在神经退行性疾病中的作用与机制越来越受到研究者的重视。LINC00472定位于人染色体6q13,目前未见其在AD中作用的报道。LIM同源盒转录因子在神经系统的发育及分化过程中发挥重要作用。在帕金森中LMX1B的缺失会导致神经元损伤,但是否在AD的神经元损伤中发挥作用并未见报道。HAX1已被报道在调控细胞凋亡的过程中发挥关键作用。研究证实HAX1能够减轻心肌细胞,脊髓神经元等多种细胞损伤,但在AD中如何发挥作用尚未见报道。SMD途径是指LncRNAs的Alu元件通过与靶基因mRNA的Alu元件结合形成STAU1结合位点,并招募STAU1结合于SBS,从而促进下游靶基因的mRNA与移码增加蛋白1（UPF1）结合,加速下游靶基因mRNA的降解。目前尚未见SMD途径在AD中调节神经元损伤的研究报道。本研究旨在探讨ZEB1、LINC00472、LMX1B、HAX1的表达水平及相互作用,探索其对AD中神经元损伤的影响及作用机制,为AD的治疗提供新的理论依据。方法:1.构建AD神经元损伤模型。2.内源性表达:Western Blot实验和q RT-PCR实验验证ZEB1、LINC00472、LMX1B、HAX1的内源性表达。3.Ch IP实验和双荧光素酶实验验证ZEB1和LINC00472启动子间,LMX1B和HAX1启动子间的结合。双荧光素酶实验验证LINC00472与LMX1B mRNA 3’UTR之间的结合。RIP和RNA pull-down实验验证LINC00472,LMX1B,STAU1之间的结合。4.CCK-8实验检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:本研究发现在Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞中,ZEB1、LMX1B和HAX1低表达,LINC00472高表达。过表达ZEB1、LMX1B、HAX1,敲减LINC00472会增强细胞活力,抑制细胞凋亡。ZEB1与LINC00472的启动子区结合,抑制其转录,下调其表达;下调LINC00472通过Alu元件与LMX1B mRNA 3’UTR区结合形成SBS位点,招募STAU1结合,进而通过SMD途径抑制LMX1B mRNA的降解,上调LMX1B的表达;上调的LMX1B与HAX1的启动子区结合,促进其转录,从而增加Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞活力,抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤。结论:1.本研究发现在Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞中,ZEB1、LMX1B和HAX1低表达,LINC00472高表达。过表达ZEB1、LMX1B、HAX1,敲减LINC00472会增强细胞活力,抑制细胞凋亡。2.ZEB1能够抑制LINC00472转录,下调其表达,从而增强细胞活力,抑制细胞凋亡。3.LINC00472能够通过Alu元件与LMX1B mRNA 3’UTR结合形成SBS位点,招募STAU1和UPF1与之结合,降解LMX1B mRNA。下调LINC00472能够通过SMD途径抑制LMX1B mRNA降解,增强细胞活力,抑制细胞凋亡。4.LMX1B能够抑制HAX1转录,下调其表达,从而增强细胞活力,抑制细胞凋亡。
其他文献
目的:神经退行性疾病是脑和脊髓中的神经元逐渐丢失所导致痴呆等症状的一类退行性疾病,好发于中老年人,包括阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）、帕金森病（Parkinson’s disease,PD）等,其病因尚不完全清楚。c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）通路在AD和PD的病理机制中发挥着关键作用,并日益被认为是其发病机制中的重要
目的:姜黄素在治疗重性抑郁障碍（major depressive disorder,MDD）方面具有广阔的应用前景,然而目前相关的随机对照试验结果并不一致。因此,本系统综述和meta分析旨在综合评估姜黄素治疗MDD的有效性和安全性。方法:在Pub Med、EMBASE、Psyc INFO、Web of Science、Cochrane Library、CKNI、万方、维普、中国生物医学文献数据库和
目的:阿司匹林的应用对老年认知功能影响的临床研究颇多,但各研究结果不一致。本研究旨在系统评价阿司匹林干预与老年人痴呆及轻度认知障碍（全称,MCI）发生风险之间的关系。研究方法:计算机系统检索PubMed、Web of Science、the Cochrane Library、Embase数据库,查找和收集相关的随机对照试验（RCT）和队列研究,所纳入文献时间从2000年1月1日至2020年4月11
目的:系统评价氨磺必利与其他抗精神病药相比较对精神分裂症患者认知功能的影响情况。方法:通过查询时间线1995年至今的Pubmed、Embase、Cochrane Library、w eb of science、中国知网、万方、维普等中外文献大数据,收集关于氨磺必利与其他抗精神病药对于精神分裂症患者在认知功能方面影响的随机对照试验（randomiz ed controlled trial,RCT）,
目的:通过对随机对照试验（randomized controlled trials,RCTs）提供的证据的分析,评估胆碱酯酶抑制剂（cholinesterase inhibitors,Ch EIs）治疗重度阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的疗效和安全性。方法:检索2021年2月之前发表在Pub Med、Embase和Cochrane Library等数据库上的文献,按照
目的:调查分析慢性疼痛患者焦虑抑郁患病情况及其相关影响因素。研究方法:统计2019年05月至2020年01月于中国医科大学附属第一医院疼痛门诊患者,筛选出慢性疼痛（疼痛时间大于3个月）患者纳入本研究。采用视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）评定患者的疼痛程度,通过7条目广泛性焦虑量表（generalized anxiety disorder-7,GAD-7）评估患者焦
目的:探讨载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）拟肽COG1410对APP/PS1双转基因小鼠认知功能的改善作用,并分析可能的机制。方法选用雄性APP/PS1双转基因AD小鼠随机分为A组（COG1410组）,B组（Model组）,选用雄性C57BL/6J小鼠为C组（Control组）,每组11只。每次注射药物前均称重,于小鼠36周龄始予A组小鼠COG1410 2mg/kg皮下注射
目的:本研究旨在系统评价阿立哌唑对儿童注意缺陷多动障碍的疗效和安全性。研究方法:对CNKI、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Pub Med、the Cochrane Collaboration database、Web of Science、EMBASE中相关的随机对照试验进行检索,检索时间截止于2021年1月。对纳入的研究进行质量评价并提取数据,使用Review Manager 5.3进行汇
目的:近年来,由于互联网设备的泛滥,许多年轻人产生了网瘾,其中青少年占据了主要比例,导致了世界范围内严重的健康和社会问题,如抑郁、焦虑和其他健康问题,包括睡眠问题。本研究旨在应用Q方法探究青少年网络成瘾自陈原因,为未来对青少年网络成瘾的早期预防和干预提供新的研究角度。同时为国内应用Q方法提供积极参考。方法:本研究采用Q方法探究综合医院青少年网络成瘾的自陈原因,分析其影响因素及干预措施等具体步骤如下
目的:重性抑郁障碍（Major Depressive Disorder,MDD）和双相障碍（Bipolar Disorder,BD）是两种至今未明确病理生理机制、难以鉴别诊断的疾病。两种疾病男性人群有着诸多类似的临床特征却又有着各自的特异性,越来越多的研究表明男性MDD患者与男性BD患者临床症状的异同点与大脑脑区的异常活动有密切联系。探讨两组人群脑区活动与疾病的关系,可帮助我们找到男性MDD患者与