【摘 要】
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背景:食管癌是我国常见的一种恶性肿瘤,其病理分型90%以上为鳞癌,具有较高的病死率,对患者生命安全造成严重威胁。随着年龄的增加,食管癌的发病率明显升高,而近年来我国人口老龄化问题日益严重,老年食管癌患者越来越多,且老年人存在机体功能的减退,其临床预后更差,因此,需要对老年食管癌早期诊断及预后判断分子标志物更深入研究。长链非编码RNA（Long no-coding RNA,Lnc RNA）对多种肿瘤
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背景:食管癌是我国常见的一种恶性肿瘤,其病理分型90%以上为鳞癌,具有较高的病死率,对患者生命安全造成严重威胁。随着年龄的增加,食管癌的发病率明显升高,而近年来我国人口老龄化问题日益严重,老年食管癌患者越来越多,且老年人存在机体功能的减退,其临床预后更差,因此,需要对老年食管癌早期诊断及预后判断分子标志物更深入研究。长链非编码RNA（Long no-coding RNA,Lnc RNA）对多种肿瘤相关基因具有调节作用,因而常被作为生物标志物应用。其中,肿瘤相关长链非编码RNA5（cancer-associated region long non-coding RNA,CARLo-5）是一种具有2628个碱基对长度的lnc RNA,发现其在多种癌症中异常表达。目前,尚无CARLo-5与食管癌的相关研究报道。本文对老年食管癌患者癌组织CARo L-5的表达特征进行了探讨,以期为早期发现及精准治疗提供临床研究数据。目的:本研究检测了老年食管癌患者癌组织标本中CARLo-5的表达水平,分析了CARLo-5表达与发病风险、临床分期及预后等之间的相关性,并初步探讨了可能的下游分子机制,为食管癌的防治提供新的思路和靶点。方法:1.本研究以吉林省肿瘤医院于2017年1月～2021年10月手术切除食管癌的老年患者（65～83岁）,共97例作为研究对象,收集了其食管癌组织和癌旁正常组织（距离癌组织≥5cm）。收集患者基础病等相关临床资料,记录患者总生存期（Overall survival,OS）。2.采用RT-PCR测定CARLo-5及miR-219a表达水平,比较二者相关性。3.比较癌组织与癌旁组织CARLo-5表达水平的差异;比较分析CARLo-5表达水平与患者性别、年龄、体重指数、肿瘤直径、病理分型、OS等之间的相关性。4.多因素Logistic回归分析影响食管癌患者预后危险因素;5.观察癌组织与癌旁组织miR-219a表达差异,采用双荧光素酶实验验证CARLo-5与miR-219a靶向性。结果:1.癌组织CARLo-5相对表达量（2.73±0.46）明显高于癌旁组织（1.00±0.02,P＜0.05）。2.癌组织CARLo-5表达与性别、年龄、体重指数、肿瘤直径无关（P＞0.05）,而与患者饮酒史、T分期、临床分期、淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。3.对入组患者随访9个月～45个月,平均随访25个月。以CARLo-5表达2.73为界,分为低表达（n=51）和高表达（n=46）。CARLo-5高表达患者OS（27个月）明显短于低表达患者（43个月,P＜0.05）。4.经多因素Logistic回归分析显示,饮酒史、T分期T3～T4期、临床分期III～IV期、淋巴结转移和CARLo-5高表达为影响食管癌预后独立危险因素（P＜0.05）。5.PCR检测结果显示,癌组织miR-219a相对表达量（0.489±0.152）显著低于癌旁组织（1.082±0.219,P＜0.05）。相关性分析结果显示,癌组织CARLo-5表达与miR-219a表达呈显著负相关关系（P＜0.05）。6.经靶基因预测CARLo-5的靶向miRNA,通过Lnc Base Predicted v.2在线软件预测显示CARLo-5与miR-219a存在结合位点。双荧光素酶报告基因实验结果显示,ECA109细胞中转染miR-219a mimic与阴性对照组miR-NC后,CARLo-5-WT的荧光素酶活性较转染阴性对照miR-NC明显降低（P＜0.05）,而CARLo-5-MUT的荧光素酶活性无明显变化（P＞0.05）,表明CARLo-5与m-219a存在靶向关系。结论:1.老年食管癌患者癌组织中CARLo-5高表达,且与饮酒史、T分期、临床分期、淋巴结转移和预后密切相关;2.老年食管癌组织miR-219a低表达,CARLo-5与miR-219a表达呈显著负相关,并存在靶向调控关系,可能是CARLo-5高表达调控机制之一。
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