【摘 要】
：
目的:研究自噬在LXR受体激动剂（GW3965）抑制肺癌细胞对吉非替尼继发性耐药中的作用及可能机制。材料与方法:采用MTT法测定LXR受体激动剂（GW3965）联合吉非替尼对PC9/GR细胞增殖的影响;使用Western blot法测定LXR受体激动剂（GW3965）和吉非替尼联合用药时,PC9/GR细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达的变化;并利用吖啶橙（AO）染色法,荧光显微镜观察LXR
论文部分内容阅读
目的:研究自噬在LXR受体激动剂（GW3965）抑制肺癌细胞对吉非替尼继发性耐药中的作用及可能机制。材料与方法:采用MTT法测定LXR受体激动剂（GW3965）联合吉非替尼对PC9/GR细胞增殖的影响;使用Western blot法测定LXR受体激动剂（GW3965）和吉非替尼联合用药时,PC9/GR细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达的变化;并利用吖啶橙（AO）染色法,荧光显微镜观察LXR受体激动剂（GW3965）和吉非替尼联合用药时PC9/GR细胞自噬小体的变化;流式细胞术检测LXR受体激动剂（GW3965）联合吉非替尼对PC9/GR细胞凋亡的影响;Western blot法测定LXR受体激动剂（GW3965）和吉非替尼联合用药时,PC9/GR细胞中自噬信号通路相关蛋白:AKT和p-AKT、m TOR和p-m TOR、AMPK和p-AMPK以及70s6k1和p-70s6k1的表达情况。结果:1.吉非替尼和GW3965单药都显示出一定的抑制PC9/GR细胞增殖的效应,此种效应在单药药物浓度≥20μM时更明显（P<0.05）;GW3965联合吉非替尼对PC9/GR细胞增殖的抑制明显优于吉非替尼单药（P<0.05）和GW3965单药（P<0.05,1μM和10μM时:P<0.01）。2.与对照组比较,吉非替尼和GW3965单药对PC9/GR细胞自噬相关蛋白Beclin1的表达以及LC3 II/I比例无明显影响（P>0.05）,二者联合用药促进了Beclin1的表达以及LC3 II/I比例的上升（P<0.01）;与吉非替尼或GW3965单药比较,二者联合用药也促进了Beclin1的表达（P<0.01）以及LC3 II/I比例的上升（P<0.05）。3.与对照组比较,吉非替尼单药对PC9/GR细胞自噬小体的产生无明显影响（P>0.05）,而GW3965单药促进了PC9/GR细胞自噬小体的产生（P<0.05）;无论是与对照组比较（P<0.01）,还是与吉非替尼（P<0.01）或GW3965单药（P<0.05）对比,联合用药促PC9/GR细胞形成自噬小体的效应更明显。4.吉非替尼和GW3965单药都促进了PC9/GR细胞的凋亡（P<0.001）,二者的联合用药进一步增加了细胞的凋亡（P<0.01）。5.无论与对照组比较,还是与GW3965或者吉非替尼单药比较,吉非替尼和GW3965联合用药都降低了p-AKT和p-m TOR蛋白的表达,升高了p-AMPK蛋白水平。结论:LXR受体激动剂（GW3965）联合吉非替尼可能通过诱导自噬抑制PC9/GR细胞增殖,其机制与AKT/m TOR和AMPK自噬信号通路有关。
其他文献
第一部分青少年特发性脊柱侧凸矫形手术术后早期并发症的种类、发病率以及预测因素目的:青少年特发性脊柱侧凸（Adolescent idiopathic scoliosis,AIS）矫形手术治疗后仍存在广泛的并发症,但纳入麻醉诸多因素的研究报道甚少。本研究纳入围术期麻醉相关因素,确定术后早期并发症的种类、发病率以及预测因素。方法:收集2012年12月至2016年1月接受AIS手术的986例患者,回顾分析
第一部分:DACH1在胶质瘤中的表达及对胶质瘤细胞的影响【目的】研究DACH1在不同恶性程度胶质瘤中的表达情况、DACH1的表达与胶质瘤患者生存率的关系及对胶质瘤细胞活力和生存率的影响。【方法】通过对中国胶质瘤基因组图谱数据库（CGGA）中220例不同级别胶质瘤样本（97例低级别胶质瘤、34例间变性胶质瘤和89例胶质母细胞）及美国大脑肿瘤分子数据库（REMBRANDT）中410例不同级别胶质瘤样本
世界范围内,胃癌是排名前五位的高发恶性肿瘤,亦是肿瘤致死的前三位病因,给全球人类造成了严重的社会卫生健康负担。而我国,地处东南亚区域,是全球范围内胃癌高发区域,现患病人多,确诊即进入进展期的病人比例高,导致胃癌诊疗在我国存在困境,治疗效果欠理想,给我国人民健康造成了巨大的影响,增加社会卫生保健负担。目前,根据国际通行的NCCN指南,胃癌诊疗以手术、化疗、放疗为主,术前、术后化疗是胃癌诊治过程中的重
第一部分妊娠期糖尿病患者Lp-PLA2的活性变化及临床意义目的分析妊娠期糖尿病（stational diabetes mellitus,GDM）患者脂蛋白相关磷脂酶A2（Lipoprotein-associated Phospholipase A2,Lp-PLA2）的活性变化及与妊娠结局的相关性,以探讨引起妊娠期糖尿病发病及导致不良妊娠结局的深层机制。方法选取2017年5月至2018年5月在连云港
目的:相对于年轻肝脏,老龄肝脏的缺血再灌注（Ischemia and Reperfusion,IR）损伤更为严重。本研究旨在探讨缺血预适应处理以及雷帕霉素药物预处理对老龄小鼠肝脏缺血再灌注（IR）损伤的影响及其相关机制。方法:将年轻（8周龄）和老龄（60周龄）的小鼠随机分为缺血再灌注（IR）模型组（CON-IR）及假手术对照模型组（Sham）。同时在实验中进一步将老龄小鼠随机分为6组:正常IR模型
BANCR已被报道与多种类型癌症的发生发展密切相关。然而,BANCR在胰腺癌中的表达、生物学功能及其调节机制尚不清楚。在本次研究中,我们探索了BANCR对胰腺癌的体外致癌活性和潜在机制。实验结果表明BANCR在胰腺癌组织和细胞中表达上调,且BANCR与肿瘤淋巴结转移和分期有关。BANCR可增强PANC-1和SW1990胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。此外,miR-195-5p在胰腺癌组织和细胞株
在全世界的女性中阴道炎的发生非常普遍,特别是育龄妇女,并且与炎症性疾病中早产和盆腔感染的风险显著增加有关。阴道菌群的失衡是阴道炎的主要原因,最终促进阴道感染的发生和发展。然而,相关的发病机制仍然知之甚少。研究目的:miR1976/CD105/整合素αvβ6通路在大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染致阴道炎中的作用,了解其可能的机制。研究方法:使用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染的小鼠阴道炎模型,采用多种分子生
结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是全世界男性和女性中最普遍、最致命的肿瘤类型之一。几十年前结直肠癌还是发病率较低的恶性肿瘤。然而目前,它已成为发病率最高的消化道恶性肿瘤,并且约占西方国家癌症相关死亡原因10%。我国虽然是发展中国家,但大肠癌在我国情况也不容乐观。近年来结直肠癌的发病率及死亡率一直呈现增长趋势。在发达国家的结肠直肠癌发病率的“上升”,可以归因于日益老龄化的人口、
肾移植是终末期肾病患者最有效的肾脏替代治疗手段。肾移植术后多种并发症,如移植肾排斥反应、新发/复发的肾小球疾病等,均会不同程度地影响移植肾的短期和长期预后。移植肾活检虽是绝大多数移植肾功能不全病因诊断的金标准,但是其本身是一项有创操作,有移植肾出血、肾周感染甚至是移植肾破裂等潜在风险。肾脏纤维化是决定移植肾预后的一项重要因素。目前对移植肾间质纤维化程度的评估需借助肾活检来明确。由于技术条件的限制以