【摘 要】
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马流产沙门氏菌病又称马副伤寒(equine paratyphoid),是由马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi)引起马属动物流产的传染病,同时该病还可引起公马关节突出和马驹的腹泻。
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马流产沙门氏菌病又称马副伤寒(equine paratyphoid),是由马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi)引起马属动物流产的传染病,同时该病还可引起公马关节突出和马驹的腹泻。马属动物感染本病后会成为该病的携带者,继而还会成为其他疾病的感染源。马流产沙门氏菌的II相鞭毛蛋白fljB,可构成鞭毛抗原(H抗原),该鞭毛蛋白对该菌在机体内的侵袭及扩散起到了关键作用,侵袭宿主后会导致机体产生强烈的免疫应答。本研究利用本实验室分离鉴定的马流产沙门氏菌新疆分离株,根据Genbank上已发表的fljB基因序列,设计一对特异性引物,扩增fljB基因并测序,利用生物软件对fljB进行序列分析,结果表明,马流产沙门氏菌新疆分离株fljB基因序列与已发表马流产沙门氏菌株同源性很高。将fljB基因片段克隆至pET-28a载体中,经酶切鉴定,成功构建原核重组体pET-28a-fljB,转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导表达并纯化后,重组蛋白fljB经SDS-PAGE检测表明,该重组蛋白分子量约为42 kD。Western blotting检测显示,其可与马流产沙门氏菌全菌血清反应,表现出良好的抗原性。将纯化的fljB蛋白免疫小鼠,特异性抗体滴度可达到1∶64000。本实验成功克隆马流产沙门氏菌鞭毛蛋白flj B,构建了pET-28a-fljB原核重组体,将纯化后的重组蛋白免疫小鼠产生良好的体液免疫,初步验证了重组表达的马流产沙门氏菌fljB鞭毛蛋白具有良好的免疫原性,为今后利用该蛋白进行相关研究奠定基础。
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