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杏仁核作为控制情绪的边缘系统的重要组成部分,与情绪异常、特别是与恐惧情绪相关的精神疾病有关,包括阿尔茨海默症、自闭症、焦虑症等。杏仁核到初级和高级皮层以及海马有大量的投射,所以杏仁核参与调控传统信息的感知敏感度,以及后期信息整合的巩固和记忆。杏仁中央核和基底核在恐惧条件化、动机奖赏、药物成瘾以及颞叶癫痫中都起到重要作用。神经连接是神经元行使功能的生理学基础,神经连接的研究对于揭示其神经功能有着重要的指导意义。 几年来,随着神经连接技术的发展,嗜神经病毒已经成为方便有效的神经环路示踪技术。经过遗传改造的嗜神经病毒可以特异的标记注射区的神经元,不同的嗜神经病毒可以特异的在神经中沿轴突或树突方向进行跨突触传递,实现对神经环路顺向或者逆向的示踪标记,此外,该技术还可以实现对特定类型神经元的标记,或者控制其跨突触能力,限定其感染标记范围。嗜神经病毒内一般会插入荧光蛋白基因,该基因会在被感染的神经元中表达,这样就实现了被标记神经环路的便捷观察。另外,由于嗜神经病毒能够在神经元内进行自我复制,所以在跨突触后不会出现信号衰减。嗜神经病毒的这些优势使其得到越来越广泛的应用。 本实验中应用了一种新型构建的狂犬病毒(RV),该病毒是是一种嗜神经病毒,能在神经元中逆向传导,且不跨突触。本文中将该病毒注射到杏仁中央核,7天后取脑组织切片观察,发现病毒标记到了初级躯体感觉皮层、次级躯体感觉皮层、运动皮层、内嗅皮层、边缘皮层、岛叶皮层等皮层区域;还标记到纹状体、伏核、苍白球等区域,另外,在杏仁核其他各区中都有杏仁中央核的投射,在隔区的斜角带水平肢和竖直肢也有少量的标记,视前区各区域都有大量的标记。此外,该病毒还在下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核,背内侧、下丘脑腹内侧核,中部、下丘脑腹内侧核,腹外侧部分、下丘脑弓状核、内侧膝状体核内侧、未定带、杏仁核梨状体过渡区、杏仁核海马过渡区,后内侧部分、海马锥体细胞层、海马CA1区、腹背侧被盖区等脑区都有标记。该结果与之前的报道有所不同,可能是因为RV病毒并不能跨突触传导,而是从轴突到树突。所以,能够准确的标记了杏仁中央核的逆向投射。本实验中用RV病毒注射到小鼠杏仁中央核,并观测其在脑区的部位。嗜神经病毒实验作为研究脑区投射的新方法,为进一步研究抗焦虑、抑郁以及帕金森等神经退行性疾病提供手段,奠定基础。