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猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PR/RSV)引起的以感染猪发热、厌食,妊娠母猪晚期流产、早产、产死胎、弱胎和木乃伊胎,各种年龄猪(特别是仔猪)呼吸障碍为特征的高度传染性疾病。目前PRRS已遍布世界各个养猪国家。自1995年PRRS传入我国大陆地区以来,该病在国内呈现明显的高发趋势,特别是在2006年,高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)的发生,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。近几年来,在我国又陆续发现新的PRRSV毒株,如NADC30-like、GM2等。PRRS尚无特效药物疗法,主要采取综合防制措施限制病毒在养猪生产的各环节传播以及对症疗法。然而,控制PRRS最根本的办法还是要走净化之路(猪场净化、区域净化)。本研究以某规模化种猪扩繁场(由原先的PRRS阴性场感染成为PRRS阳性场)为实践对象,通过人工主动感染(血清驯化)和封群排毒净化方案的实施,实现了该猪场再次由PRRS阳性转为PRRS阴性,从而为PRRSV感染猪场制定有效的控制和根除措施提供实践参考依据。(一)猪场PRRSV感染及毒株类型的确定利用RT-PCR对病死猪的肺脏组织进行PRRSV检测,ELISA对仔猪、后备猪、母猪的血清进行PRRSV抗体检测,分子生物学技术对ORF5基因的PCR产物进行克隆、重组、鉴定、测序与分析,以确定感染PRRSV的毒株类型。结果显示,所取10头病死猪的肺脏组织均检测出PRRSV。85份血清样品检测出PRRSV抗体34份,总阳性率为40%,平均抗体S/P值为0.43,离散度为75.2%,其中仔猪阳性血清19份,阳性率为47.5%(19/40),平均抗体S/P值为0.42,离散度为52.7%;后备猪全部为阴性;母猪阳性率为50.0%(15/30),平均抗体S/P值为0.45,离散度为71.8%。扩增的ORF5基因序列(代号为AHChen-2017)与欧洲型毒株的相似度在64.7%～67.0%之间,与美洲型代表毒株VR-2332的相似度为86-1%,与HP-PRRSV代表毒株JXA1的相似度为97.4%,与国内经典株CH-1a的相似度为93.5%,与NADC30-like毒株(NVDC-R244-2014、NVDC-HeB1-2011)的相似度为 98.1%,且与NVDC-R244-2014处于同一分支。结果表明,本试验猪场出现的疫情系由PRRSV感染所致,感染的PRRSV 类型为 NADC30-like毒株。(二)猪群血清驯化、封群排毒、闭群监测与净化效果评价首先利用本场阳性猪的病毒血清,根据RT-PCR的鉴定结果确定血清最佳稀释浓度,定量稀释后釆用人工主动感染方式,对每头猪进行血清接种,接种后实行有效隔离,开展封群排毒,在此期间,对闭群猪群从PRRSV病原、抗体以及仔猪、后备猪和母猪的生产、生长性能方面进行持续性监测。结果显示,血清驯化的最佳稀释浓度为1:200,肌肉注射母猪650头、2mL/头,仔猪1400头、0.5mL/头,后备猪1500头、2mL/头;封群时间为200d;封群后第4、8、11、20、28周逐—分别检测,肺脏样品中PRRSV病原在第20、28周均为阴性,血清中PRRSV抗体在第20、28周阳性率均为0,平均抗体S/P值在第28周均降至0.10;母猪在第2周死亡200头、第3周死亡降至50头后,每周死亡的数量逐步下降,第14周后趋于稳定,同时母猪产死胎和木乃伊胎处于正常值范围内,而产活仔数、分娩率及流产情况均于第20周之后趋于平稳且在正常值范围内;仔猪在经历第1～11周死亡率忽高忽低之后,逐渐下降至第20周达到最低点5.4%,其后整体状态一直稳定良好;并且在整个封群中后期都进行了不间断的检测均为阴性及生长性能稳定,结果表明本次实践让该猪场实现了PRRSV的净化,再次由PRRS阳性场转为阴性场。