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伤口愈合是器官再生的起始阶段,而愈合产生的瘢痕抑制这种再生形成,因此,皮肤无瘢痕愈合在再生医学研究领域备受关注。大多数蜥蜴类爬行动物具有断尾再生和断肢瘢痕愈合的差异化组织器官再生能力。不同蜥蜴物种的躯干部与尾部伤口愈合过程也不尽相同,开展不同蜥蜴物种伤口无瘢痕愈合过程的组织形态学研究,既可丰富蜥蜴类爬行动物的伤口愈合机制研究资料,又有利于从进化角度探究高等脊椎动物及人类皮肤组织再生机理。本实验以我国特有卵胎生蜥蜴—秦岭滑蜥为研究对象,对其躯干部及尾部进行直径为1.5mm的皮肤全层切口,活检记录其伤口愈合过程的大体解剖形态,利用常规组织学方法、免疫组织化学方法和扫描电镜技术对秦岭滑蜥躯干部和尾部愈合过程中不同时间点的细胞构筑特征进行观察。结果显示:1.秦岭滑蜥躯干部与尾部创面在愈合过程中会经历两次先缩小后增大再缩小的阶段,躯干部在创伤后60-80d伤口愈合速度较快,尾部在创伤后20-40d伤口愈合速度较快,秦岭滑蜥躯干部伤口愈合的平均速度为0.020±0.002 mm2/d,尾部伤口愈合的平均速度为0.016±0.001 mm2/d。2.基于组织形态学,秦岭滑蜥创面愈合可分为止血、伤口再上皮化、增殖以及组织重塑四个时期,由六个阶段组成。阶段Ⅰ,创伤后0-48h,尾部和躯干部创面的伤口边缘均有大量色素沉着,但躯干部创面出血量较大,而尾部创面无明显出血;阶段Ⅱ,创伤后2-10d,尾部与躯干部创面形成血凝块并逐渐增厚;阶段Ⅲ,创伤后7d-15d,两部位创面先形成仅有2-3层细胞厚度的皱缩伤口上皮,接着逐渐分层,在伤口上皮形成创面表皮脱落角质层;阶段Ⅳ,创伤后10-28d,在创面表皮脱落角质层下面又形成创面表皮角质层,表皮与真皮交界处有色素细胞生成,整个再生组织中形成血管网,皮肤较薄,血管量少,愈合过程中也无肉芽组织形成;阶段Ⅴ,创伤后20-70d,再生表皮角化,并开始形成形态不清晰的鳞片,深层真皮随机分布有黑色素团,下层形成黄色素细胞层;阶段Ⅵ,创伤后45-135d,表皮、真皮、鳞片完全分化,伤口无瘢痕愈合。3.在秦岭滑蜥皮肤伤口愈合过程的第Ⅰ阶段,增殖细胞核抗原免疫阳性细胞丰富,创面细胞增殖活跃。基质金属蛋白酶-9主要在伤口上皮呈免疫阳性,表明其参与细胞外基质重塑过程。细胞角蛋白6阳性细胞主要分布于Ⅱ-Ⅲ阶段的角质形成细胞中,参与表皮分化。α-平滑肌肌动蛋白在Ⅱ-Ⅲ阶段的肌成纤维细胞阳性较强,促进伤口挛缩。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶阳性主要分布于Ⅱ-Ⅲ阶段皮肤损伤区内的中性粒细胞、单核巨噬细胞及成纤维细胞中以降低炎症反应、抑制瘢痕形成。在伤口愈合的第Ⅰ-Ⅲ阶段,凝血酶敏感蛋白-1阳性细胞丰富,抑制血管过早形成。血管内皮生长因子阳性细胞在第Ⅳ-Ⅵ阶段数量较多,促进血管生成。第Ⅴ-Ⅵ阶段,成纤维细胞和血管内皮细胞转化生长因子-β3阳性明显,可促进血管网的建立并抑制肉芽组织形成,利于伤口无瘢痕愈合。4.扫描电镜所呈现的尾部与躯干部创面的结构相似。伤口愈合第Ⅰ阶段,躯干部创面处血细胞大量聚集,较尾部丰富;伤口愈合第Ⅱ-Ⅲ阶段,创面被覆类似于纤维蛋白构成的丝状网络;伤口愈合第Ⅳ-Ⅴ阶段,创面有杆菌分布;伤口愈合第Ⅵ阶段,创面密被再生鳞片,其尺寸和形状与未受损鳞片一致,但再生鳞片上的微皮纹稀疏,角皮层细胞表面的齿状结构较为钝化。综上,秦岭滑蜥躯干部与尾部皮肤创面均可无瘢痕愈合;PCNA、MMP-9、cytokeratin6、α-SMA、C3、TSP-1、VEGF和TGF-β3免疫细胞定位呈现再生时期和不同阶段特异性,参与秦岭滑蜥皮肤创面无瘢愈合;秦岭滑蜥再生鳞片与未受损鳞片形态一致,但微皮纹特征存在一定差异。上述组织形态学结果为进一步探究秦岭滑蜥皮肤无瘢痕愈合的分子调控机制奠定了基础。