高通量测序鉴定百香果、鸢尾、二月兰、苦荬菜和细茎斑种草中的病毒

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shyandi123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
高通量测序技术(High-Throughput Sequencing,HTS)已广泛应用于抗病基因研究、抗逆基因筛选以及作物新病毒种类鉴定等方面。基于第二代测序技术,结合RT-PCR、Rapid amplification of c DNA end(RACE)、测序分析等分子生物学实验与分析方法,通过对对百香果、鸢尾、二月兰、苦荬菜和细茎斑种草等5种植物上病毒进行了鉴定分析,检测到12种病毒。采用HTS和RT-PCR验证相结合的方法对云南省文山市采集的呈现叶片黄化,卷曲,皱缩症状的百香果样品进行了病毒鉴定。检测结果表明百香果样品中有四种病毒,其中有三种属于马铃薯Y病毒属(Potyvirus):即东亚西番莲病毒(East asian passiflora virus,EAPV),西番莲重型斑驳相关病毒(Passionflower severe mottle-associated virus,PFSMa V),夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus,Tel MV);另一种病毒为弹状病毒科(Rhabdoviridae)细胞质弹状病毒属(Cytorhabdovirus)的百香果相关弹状病毒(Passionfruit-associated rhabdovirus,Pa RV)。将三种potyviruses的CP蛋白进行了比对,发现它们具有较多相似的特性;测定了细胞质弹状属病毒Pa RV的基因组全序列。从云南省丘北县采集了66个来自不同种植区的百香果样品,利用RT-PCR检测进行了病毒检测,结果表明66个百香果样品全部带毒,其中,有26个样品受到EAPV单独侵染,14个样品受到Tel MV单独侵染,1个样品受到Pa RV单独侵染;17个样品受到EAPV和Tel MV复合侵染,5个样品受到EAPV和Pa RV复合侵染,1个样品受到Tel MV和Pa RV复合侵染;2个样品受到三种病毒的侵染。从北京市观赏植物鸢尾和二月兰和药用植物苦荬菜、独行菜和细茎斑种中采集到带有花叶、皱缩等病毒症状的叶片样本,利用HTS和RT-PCR进行了病毒检测,从鸢尾中检测到鸢尾重花叶病毒(Iris severe mosaic virus,ISMV),二月兰中鉴定到油菜花叶病毒(Youcai mosaic virus,Yo MV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)和一种未知的弹状病毒,苦荬菜中鉴定到苦荬菜黄斑驳病毒(Ixeridium yellow mottle virus,IYMV),一种双分体病毒科(Partitiviridae)病毒和一种未知的弹状病毒,细茎斑种草中鉴定到莲花潜隐病毒(Lotus latent virus,LLV),独行菜中未检测出病毒。获得苦荬菜中新弹状病毒的全基因组序列,暂命名为苦荬菜相关弹状病毒(Ixeris denticulata-associated rhabdovirus,Ida RV)。
其他文献
扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley(半翅目:粉蚧科)为我国农业和林业检疫性有害生物,是棉花Gossypium spp.、番茄Solanum lycopersicum、马铃薯Solanum tuberosum、扶桑Hibiscus rosa-sinensis和木芙蓉Hibiscus mutabilis等多种作物及观赏植物的重要害虫。近十多年来,人们已广泛开展有关该
学位
果蝇是世界性的重要害虫之一。黑腹果蝇Drosophila melanogaster和斑翅果蝇 Drosophila suzukii是两种最常见的两种危害性果蝇,能直接或间接为害香蕉Musa nana、草莓Fragaria × ananassa等多种水果,并造成巨大经济损失和生态破坏。化学药剂是目前果蝇防治的主要手段,然而化学农药的使用不仅会带来农药残留问题,还会导致果蝇抗药性的增强。绿色高效的监测
学位
由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是多种果蔬上常见的真菌病害,在作物苗期到果实成熟的各个时期均会发生,严重威胁果蔬产量和品质安全。化学防治是防治灰霉病的主要手段,但是由于长期用药,灰葡萄孢菌已对多种杀菌剂产生了抗药性,导致不少地区药剂防效下降。为了解灰葡萄孢菌对新型琥珀酸脱氢酶抑制剂(SDHI)氟唑菌酰胺抗性的抗性风险及发生情况,本研究从田间采集的病番茄样本上分离鉴定到了
学位
昆虫嗅觉系统在昆虫求偶、识别寄主和产卵行为中发挥重要作用。为进一步理解东方粘虫Mythimna separata(Walker)的求偶行为,探明雄蛾对性信息素的分子识别机制,本研究分别以Z11-16:Ald(Ⅰ型)、Z11-16:Ac和Z11-16:OH(Ⅱ型)为性信息素主成分诱捕田间东方粘虫雄蛾,通过触角RNA转录组测序分析、触角电位实验和RT-q PCR,比较两种性信息素类型的东方粘虫在基因表
学位
对来自云南、浙江和内蒙古的30属禾本科植物的1821株内生真菌,根据ITS r DNA系统发育分析和ITS预测真菌的阈值,将这些菌株鉴定为3门10纲34目216属,其中子囊菌门Ascomycota 5纲26目192属,担子菌门Basidiomycota 3纲6目21属,毛霉门Mucoromycota 2纲2目3属。粪壳菌纲Sordariomycetes和座囊菌纲Dothideomycetes为主要
学位
生物防治是保护农田生态环境、保证粮食供给安全和促进现代农业发展的重要植保手段。寄生蜂作为一种重要的天然生物防治资源,在自然环境中具有种类多、数量大、且寄生特性丰富多样等特点。寄生蜂产卵孵化后,幼虫通过取食寄主血淋巴等获取营养,以完成生长发育。目前,对于寄生蜂幼虫取食寄主行为直接相关的唾液及唾液腺的研究仍较为缺乏。麦蛾柔茧蜂(Habrobracon hebetor Say)属膜翅目茧蜂科,是一种外寄
学位
植物内生真菌是自然生态系统中植物根系微生物群落的重要组成部分,在促进植物营养吸收、生长发育、增强植物先天免疫和抵抗环境胁迫等方面发挥着重要作用。挖掘有益内生真菌资源,探索其在促进生长和免疫诱抗方面的功能,具有重要的科学意义。本研究通过微生物组学分析比较了疣粒野生稻、药用野生稻和普通野生稻之间的内生真菌生物多样性差异。并对野生稻根部内生真菌进行分离、纯化和鉴定,明确内生真菌分类地位及生物学功能,重点
学位
花境是以多年生观花植物为主营造的、近人尺度的植物造景形式,充分体现了丰富的植物色彩和多样性,近年来越来越多地应用于城市绿地。然而,国内花境设计与营建尚存在质量参差不齐的问题,针对花境色彩特征的景观评价研究较少,且多以定性分析和主观评价为主。本文以沪杭地区花境为例,通过问卷和面部表情识别技术获取公众的主观偏好和客观情感感知反馈,对花境色彩特征进行量化分析,并结合经典花境案例的配置手法,总结花境色彩设
学位
大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病是棉花上危害最严重的病害之一,该病害在我国棉花产区广泛发生,其主要致病菌株为大丽轮枝菌落叶型株系。已有研究表明,大丽轮枝菌产生的N-乙酰乙醇胺类(NAEs)化合物NAE 12:0是引起棉花落叶的直接原因。本实验室前期研究发现,新种棉帚霉菌作为一个机会病原菌,与大丽轮枝菌共接种可增加病害严重度,并促进落叶,但致病机制尚不清楚。因此,本文通过分析棉帚霉菌代谢物,明确棉帚霉菌是
学位
春兰(Cymbidium goeringii)作为传统国兰五大类之一,栽培历史悠久,资源丰富,兼具审美、文化和经济价值,是中国传统十大名花之一。种子萌发困难、繁殖系数低、杂交育种周期长等问题一直制约着春兰的发展,近年来,野外挖掘采集也使春兰种质资源遭到破坏。‘虎蕊’为春兰珍品,屡次在兰展中获奖,目前未见对其进行组培研究的报道。针对以上问题,本研究以春兰‘虎蕊’自交后代根状茎为试验材料,运用植物组织
学位