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[背景]结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一种常见的消化道恶性肿瘤,我国结直肠癌的发病率位于各种恶性肿瘤中的第四位,死亡率位于第五位,而且有逐年上升的趋势,严重威胁着人们的生命健康。结直肠癌的诊断目前主要依靠病史、体格检查以及肠镜、影像学等辅助检查。多数患者确诊结直肠癌时已处于中晚期,错失了最佳治疗时机。因此,结直肠癌的早期诊治显的尤为重要,寻找结直肠癌新的早期诊断标志物和其治疗靶点,从而进一步提高治疗效果降低死亡率有相当重要的临床意义。[目的]本研究就三重基序蛋白59(TRIM59)在结直肠癌中的表达水平和对结直肠癌细胞株增殖,侵袭,迁移的影响及可能的相关机制进行了研究和分析。[方法]1.收集90例结直肠癌的手术标本,包括癌组织及与其对应的正常肠上皮组织。用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测标本中的TRIM59的表达量,再进一步分析其与临床资料的相关性;qRT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测 TRIM59 在肠癌细胞 Caco-2,SW480,HT-29,LoVo,DLD-1,HCT116 和人正常肠上皮细胞NCM460中的mRNA和蛋白的表达水平。2.利用小干扰RNA下调结直肠癌细胞株中TRIM59的表达,CCK-8、平板克隆实验和流式细胞术检测TRIM59被抑制后细胞株增殖能力的变化。划痕实验和Transwell实验观察TRIM59被抑制后对细胞侵袭和迁移的影响。3.使用Westerm blot实验检测TRIM59干扰前后凋亡相关蛋白以及上皮间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)相关蛋白的变化。4.Westerm blot实验检测PI3K-AKT通路蛋白的在TRIM59干扰组及对照组中的表达量的变化;用PI3K-AKT通路特异性抑制剂LY294002分别作用于TRIM59过表达前后的细胞株,Transwell实验观察细胞迁移侵袭能力的改变。[结果]1.qRT-PCR分析结果显示TRIM59在结直肠癌组织明显高表达,卡方检验分析显示TRIM59的表达量与以下几种临床病理资料相关:TNM分期、淋巴结转移、肿瘤浸润深度和远处转移。在细胞实验中,TRIM59在结直肠癌细胞株SW480,HT-29,LoVo,DLD-1,HCT116中的表达量相对于人正常肠上皮细胞NCM460显著升高,而Caco-2则显示表达量无明显统计学差异。2.在LoVo和DLD-1细胞株中干扰TRIM59的表达后,CCK-8和细胞克隆实验显示干扰TRIM59的表达能明显减弱结直肠癌细胞的增殖能力。流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析证明干扰TRIM59能够使细胞株的凋亡的增加。Western blot结果显示在TRIM59被干扰的细胞株中凋亡相关蛋白Bax的表达量增加,Bc1-2的表达量减少。3.Transwell实验和划痕实验发现TRIM59有增强结直肠癌细胞迁移和侵袭的能力,Western blot结果显示:E-cadherin的表达量增加,Vimentin和Snail的表达量减少。4.Westem blot结果显示TRIM59被干扰的细胞株中磷酸化的PI3K和磷酸化的AKT的表达量下降,而PI3K与AKT的表达量在对照组及实验组中无统计学差异。Transwell实验表明过表达TRIM59组相对于未处理组,细胞迁移、侵袭增强。加入PI3K-AKT通路抑制剂LY294002后,细胞迁移和侵袭能力明显减弱。[结论]TRIM59在结直肠癌组织高表达,并与肿瘤分期、淋巴结转移以及远处转移密切相关,干扰TRIM59的表达可以抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。TRIM59可能通过PI3K/AKT通路来促进细胞迁移和侵袭。TRIM59有望为结直肠癌的诊断和治疗提供新的靶点和思路。