本工作基于我们制备的高品质法布里-珀罗（FP）光学微腔,研究了一种基于光微流激光信号的腔内高灵敏度HRM熔解曲线检测方法,即采用FP光学微腔作为微激光腔,嵌入式饱和染料作为增益介质,产生的激光信号作为检测信号,通过温度扫描,实现了对碱基错配DNA分子的高灵敏度筛查与检测。我们分别研究了25个碱基对、50个碱基对、99个碱基对、130个碱基对的目标DNA及碱基错配DNA的熔解曲线;理论及实验结果表明,基于激光信号的HRM检测技术具有低的熔解温度和高的信噪比。具体工作如下:1.搭建CO₂激光加工平台,采用激光微加工的方法在熔融石英玻璃基底上制备微凹面结构,曲面结构的横向尺寸控制在40-110μm,深度3-10μm。与此同时,在单晶硅片上制备平面结构,在两种制备好的基底上镀制高反射介质膜。最后,采用单晶硅片的微平面镜-二氧化硅基底的微凹面镜,结合硅胶封装工艺,制备封闭式的法布里-珀罗光学微腔及光微流控系统,形成光微流控芯片,实现了光微流激光器件的集成。2.首先从理论上模拟了不同碱基对数的DNA分子基于荧光和激光的HRM曲线,并对结果进行了分析。随后在实验上,采用488 nm的脉冲激光器作为泵浦源,浓度为250μM的DNA与SYTO13染料混合液作为增益介质,结合高分辨熔解曲线技术,分别研究了基于荧光和激光的HRM技术,实验结果表明,基于激光的HRM技术具有更低的熔解温度和更高的信噪比。3.在激光HRM检测基础上,提出了一种常规HRM技术无法实现的新型DNA检测方法,即保持温度恒定,检测信号强度随激发光强的变化关系,提供另外一种快速、高通量DNA检测方法。