苯酚降解菌的分离鉴定及其在工业废水处理中的应用

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苯酚是被广泛应用于染料、农药、医药合成等行业生产中的原料或中间体,是工业废水中有害污染物的主要组成成分。苯酚的生物降解是修复酚污染废水的方法之一。 本研究从石油化工厂的活性污泥和废水混合物中分离到10株能以苯酚为唯一碳源和能源生长的菌株,能在15h内去除液体无机盐培养基中 800mg/L,的苯酚。对这10株苯酚降解菌进行了16S rRNA基因序列同源性分析。PD1、PD2、PD6、PD7和PD39被鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),PD4、PD5、PD8和PD9被鉴定为不动杆菌属(Acinetobacter sp.),PD3 属于丛毛单胞菌属(Comamonas sp.)。经Biolog分析,PD39 被进一步鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。 对苯酚高效降解菌PD39的降解特性、最适生长条件、底物范围、邻苯二酚1,2-双加氧酶(C120)和邻苯二酚 2,3-双加氧酶(C230)酶活性、含酚废水的生物修复等,进行了研究。PD39的最适生长条件是,苯酚浓度为800mg/L,培养基的起始pH为6.0~7.0,培养温度为30℃。在最适降解条件下,苯酚去除率可以达到94.44%。PD39可以在高达1200mg/AL苯酚浓度下生长,耐受1.5%的盐浓度。有较广的底物范围,在苯甲酸、苯乙酸和对羟基苯甲酸中可以良好生长。PD39的苯酚羟化酶大亚基基因与Pseudomonas putida CF600菌株的苯酚羟化酶大亚基基因的核苷酸序列同源性为99.70%。通过测定PD39细胞裂解液的粗酶活力,证明PD39菌株同时具有C12O和C23O活力,但C23O活力更高,因此,PD39可能主要经间位途径切割苯环。 进行了苯酚降解菌PD39用于工业废水的生物修复试验。结果表明,在70%制药厂含酚废水中,PD39生长良好,可在72h内使苯酚浓度为910mg/L,的废水的苯酚去除率达到99.96%。
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