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目的:自然界中的花色种类繁多,但是一些重要花卉都缺少蓝色花品种,所以花色改良的研究工作一直是育种工作的重要目标之一。在花色素苷代谢途径中,类黄酮3’5’羟基化酶F3’5’H是形成蓝色花最关键的酶,能使花色素的合成趋向于蓝色的飞燕草色素;二氢黄酮醇-4-还原酶DFR能特异地催化二氢黄酮醇还原成无色的花色素,对花色素苷的最终形成起决定性作用。F3’5’H基因作为蓝色基因的重要组成部分之一,研究F3’5’H基因的表达可为今后利用基因工程技术改良花色研究奠定基础。方法:本实验从蓝紫色矮牵牛的花瓣中提取总RNA ,利用RT-PCR技术进行F3’5’H cDNA片段和DFR cDNA片段的克隆。分别将F3’5’H基因和DFR基因连接到含有35S启动子的植物表达载体pBI-121上,成功构建植物表载体pBI-F3’5’H及pBI-DFR,并用农杆菌介导法对粉红色品系矮牵牛进行了F3’5’H基因的遗传转化。结果:测序结果分析表明,克隆得到的F3’5’H基因的序列与NCBI登录的cDNA序列(D14588)相似性达到99.34%,开放读码框为1521bp,编码506个氨基酸。根据F3’5’H cDNA的测序结果推算氨基酸序列,并与NCBI登录的氨基酸序列进行分析比较,发现推算的氨基酸序列与已报道的存在2个氨基酸差异,氨基酸同源率为99.6%。DFR基因的编码框长度为1143 bp,与NCBI登录的cDNA序列(X15537)相似性为99.39 %,编码380个氨基酸。根据DFR cDNA的测序结果推算氨基酸序列,与NCBI登录的氨基酸序列进行分析比较,推算的氨基酸序列与已报道序列相似性达到100%。实验利用转基因技术将F3’5’H基因转化到粉红矮牵牛中,通过对转化植株进行PCR及RT-PCR鉴定,确定已获得转基因植株,下一步将在此基础上进一步研究F3’5’H基因对花色的影响,以期得到花色变异植株。结论:本论文已从矮牵牛中成功克隆了花色素苷代谢途径中编码两个关键性酶的F3’5’H和DFR基因,构建了植物表达载体pBI-F3’5’H,建立了粉红色品系矮牵牛的再生系统,初步获得了转基因矮牵牛植株,为进一步利用基因工程技术改良植物花色奠定了基础。