毛脉酸模悬浮细胞与其内生真菌共培养体系的建立

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:terzaghi
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毛脉酸模(Rumex gmelini Turcz.)为蓼科酸模属植物,在民间多以根及根茎入药。经研究证实,毛脉酸模具有抗真菌、抗肿瘤、镇咳祛痰、平喘降压、抗病毒和抗氧化等作用,本文对毛脉酸模进行了以下研究。通过调控不同植物激素配比,进行毛脉酸模疏松愈伤组织的培养,在 MS培养基,2,4-D0.5mg/L,6-BA3.0mg/L,蔗糖 30g/L,培养温度(25±2)℃,光照14h/d,光照强度1500~2000Lx的培养条件下,获得黄绿色松散颗粒状毛脉酸模愈伤组织,可作为培养毛脉酸模悬浮细胞的材料。通过初始接种量、激素种类、植物激素浓度配比、蔗糖浓度等因素研究对细胞培养的影响,建立了毛脉酸模悬浮细胞培养体系的最佳方法:在液体MS培养基,初始接种量1g,2,4-D0.5mg/L,6-BA 2.5mg/L,蔗糖30g/L,培养温度(25±2)℃,120r/min黑暗振荡的培养条件下,可获得悬浮细胞,当培养到18d时细胞鲜重增长量达到最大值 1.0103g。通过内生真菌性状、内生真菌接种量、内生真菌接种时间、摇床转速、毛脉酸模悬浮细胞起始浓度等因素的摸索,建立了毛脉酸模悬浮细胞与其内生真菌共培养体系,方法如下:在悬浮细胞培养到9d时,加入0.1×103个/ml孢子悬浮液,培养温度(25±0.5)℃,120r/min黑暗振荡培养,获得共生培养体系。
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