肝是人体内进行酒精代谢的重要场所。长期过度饮酒,乙醇及其代谢物乙醛可使肝细胞反复发生坏死和再生,可导致酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、肝纤维化和肝硬化等肝病。当它进一步恶化加重时,甚至可能发展为肝癌。目前酒精性肝炎还没有对应的靶向药物,进一步寻找新的治疗靶点也是当前研究的热点。miRNA对众多生理活动都有调控作用,研究miRNA对酒精性肝炎的调控机制有利于开发出新的药物用于酒精性肝炎的治疗。通过分析GEO数据库里的人酒精性肝炎的miRNA和mRNA表达谱,获得差异表达miRNA和mRNA,然后使用DAVID在线网站对差异表达mRNA进行GO和KEGG富集分析;再与GEO中乙型肝炎miRNA进行联合分析,筛选出关键miRNA。并利用生物软件预测关键miRNA的靶基因,构建了酒精性肝炎关键miRNA-mRNA调控网络。然后使用同样方法对其进行GO和KEGG富集分析,结果显示靶基因参与GTPase活性的正调控、细胞活化等45个生物学过程。其中,miR-146a-5p的潜在靶基因参与蛋白质结合、胞外外体等多个生物过程和信号通路,于是决定选中miR-146a-5p作为关键因子之一,做进一步的研究。本文运用q PCR的方法检测了miR-146a-5p在酒精损伤的人正常肝细胞7702中的表达,用MTT检测了受损肝细胞活性。实验结果显示,随着酒精浓度的增加,细胞活性降低、miR-146a-5p的表达下调。为了研究miR-146a-5p对酒精损伤肝细胞的保护作用。采用脂质体介导法转染miR-146a-5p mimics。结果显示,与NC+酒精处理组相比,转染mimic的受损肝细胞中细胞活性、SOD的活性、药物代谢相关蛋白CYP2E1和细胞增殖相关蛋白PCNA的表达提高,相反,谷胱甘肽的含量、AST/ALT的值、SOX5、炎症相关蛋白TNF-α、IL-6和细胞凋亡相关蛋白BCL-2的表达下降,说明过表达的miR-146a-5p能够减轻酒精对肝细胞造成的损伤。总之,本文主要基于对GEO中人酒精性肝炎miRNA和mRNA的联合分析,筛选到了人酒精性肝炎关键miRNA,并进利用脂质体转染法验证了miR-146a-5p过表达可以减轻酒精对肝细胞的损伤。此结果为进一步开发治疗酒精性肝炎的靶向药物奠定了基础。