QuEChERS结合LC-MS/MS检测淡水鱼中6类兽药残留的方法研究

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淡水鱼具有丰富的营养价值及鲜美的口感,人们对其需求量日益上升,其质量安全问题也成为了关注的焦点。本研究主要是对淡水鱼中常见的药物残留进行检测方法研究,从而改进传统检测方法耗时长、检测药物种类单一、步骤繁琐等弊端,实现快速、准确、高效的检测目标。方法首先对LC-MS/MS条件进行研究、优化,得出适合本试验检测参数的最优仪器条件,然后比较了净化材料、提取试剂、提取方式、氮吹温度、复溶溶液比例等前处理条件对检测结果的影响,并通过正交试验对提取试剂、提取方式、氮吹温度、复溶溶液比例进行前处理条件优化。主要研究结果如下:(1)本文以草鱼、鲟鱼为研究对象,通过QuEChERS法进行前处理,结合LC-MS/MS进行检测,研究了一种可以同时快速检测淡水鱼中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、孔雀石绿及隐色孔雀石绿、酰胺醇类、喹乙醇代谢物6类24种药物残留的检测方法。(2)该方法用4%甲酸乙腈作为提取剂,涡旋-超声-涡旋的方式提取,分取5 m L提取液加入含5 m L 5 mmol/L乙酸铵溶液的EMR-Lipid净化管中,再分取6 m L加入EMR-Lipid反萃管中,取2 m L上清液50℃水浴氮吹,1 m L40%甲醇溶液复溶,通过LC-MS/MS检测,以甲醇-0.1%甲酸水/5 mmol/L乙酸铵溶液作为流动相进行洗脱,通过Zorbax SB-C18柱(2.1*50 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,正、负离子模式扫描,多重反应监测模式分段采集(d MRM)从而实现对多种类药物的同时检测分析,采用内标法定量。(3)该方法的线性范围为0.1~100μg/L,相关系数≥0.993,以3倍信噪比(S/N)为方法检出限,10倍S/N为方法定量限,方法检出限在0.01~1.00μg/kg之间,定量限在0.03~3.00μg/kg之间,低于现有国家标准规定的限量值,基本能满足现有检测限量的需求。并对草鱼、鲤鱼、雅鱼、黄河裸裂尻鱼、鲟鱼、鲢鱼、虹鳟、七彩鲑、鲈鱼、大口鲶这10种淡水鱼进行方法学验证,10种鱼中24种目标化合物高、中、低三种加标浓度的回收率在70%~110%之间,RSD低于10%,表明该方法的准确度和精密度较高,可用于这10种鱼中24种药物的残留检测。(4)通过对100个实际样品的检测以及对有检出样品的复测也表明该方法检出限低、灵敏度高、重现性好、效率高,能实现淡水鱼中多种类药物残留的检测。
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