论文部分内容阅读
6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase MGMT)属DNA修复蛋白,普遍存在于原核生物和人体细胞内。染色体的10q26位处属于MGMT的编码基因,其编码基因全长约170kh,由5个外显子和4个内含子组成。烷化剂类抗肿瘤药物在给药后,分子中的一个或多个活性烷基将会转移到肿瘤细胞DNA分子的碱基鸟嘌呤上,使O6-鸟嘌呤甲基化,形成O6-MG,O6-MG的存在阻碍了肿瘤细胞DNA的复制过程,或影响基因的表达,或导致DNA分子断裂,最终实现杀死肿瘤细胞的目的。而DNA修复蛋白MGMT能将甲基从O6-MG转移到自身第145位的半胱氨酸残基上,使半胱氨酸残基成为新的甲基受体,并使肿瘤细胞DNA链上的鸟嘌呤复原为O6-鸟嘌呤,恢复肿瘤细胞的繁殖增生能力。因此,MGMT的存在被认为是肿瘤细胞对烷化剂类抗肿瘤药物耐药性存在的主要原因,因此,对人脑胶质瘤细胞内MGMT的研究就变得尤为重要。目的:本研究通过采用免疫组织化学(Immunohistochemistry technique,IHC)的方法对人脑胶质瘤组织进行染色并HE染色定性,探究MGMT在脑胶质瘤组织中的表达情况,并与对照组的癌旁组织和正常组织的表达情况相比较,分析MGMT在不同级别的脑胶质瘤组织、癌旁组织及正常组织中的表达及其相关性,为临床上克服烷化剂类抗肿瘤药物耐药性,提高个性化治疗脑胶质瘤的效果,为临床工作的顺利开展提供参考。方法:收集泸州医学院神经外科2014年1月-2014年12月手术切除的脑胶质瘤标本76例,所有标本均经过了病理科确诊,其病理类型分别为:星形细胞瘤35例,胶质肉瘤9例,多形性胶质母细胞瘤21例,室管膜瘤6例,髓母细胞瘤5例。按照2007年who中枢神经系统肿瘤分类标准进行分级(Ⅰ~Ⅳ),将76例脑胶质瘤分为4组,其中Ⅰ级共29例,Ⅱ级共15例,Ⅲ级共19例,Ⅳ级共13例。并将Ⅰ~Ⅱ级归为良性组,Ⅲ~Ⅳ级归为恶性组,其中良性胶质瘤组织共计44例,恶性胶质瘤组织共计32例。选取的76例患者中,年龄21~69岁,平均年龄(40.12±5.74)岁,其中男性33例,女性43例。另取正常脑组织和癌旁组织各10例作为对照组。采用免疫组织化学的方法对人脑胶质瘤组织进行染色及he染色定性(hemmatoxylinandeosinstain,苏木素伊红染色),并依次mgmt的表达情况,比较mgmt在不同级别脑胶质瘤,正常组织和癌旁组织中的阳性率及其相关性,在不同年龄、性别以及不同病理类型中的阳性率及其相关性。所有数据均采用统计学的方法进行比较。结果:1.76例脑胶质瘤患者中,mgmt表达为阳性的共计35例,总阳性率为46.05%(35/76);10例正常脑组织患者中,mgmt表达为阳性的共计0例,总阳性率为0%(0/10);10例癌旁组织中,mgmt表达为阳性的共计1例,且为弱阳性,总阳性率为10%(1/10)。mgmt在脑胶质瘤,正常组织和癌旁组织中的阳性率差异具有显著的统计学意义(χ2=77.10,p=0.000),其中mgmt在脑胶质瘤中的阳性率与,正常组织和癌旁组织的差异最为明显(χ2=59.74,p=0.000;χ2=32.14,p=0.000),而正常组织和癌旁组织中mgmt的阳性率则没有明显差别。4个不同分级中,Ⅰ级mgmt的阳性率为48.28%;Ⅱ级mgmt的阳性率为40.00%;Ⅲ级mgmt的阳性率为42.11%;Ⅳ级mgmt的阳性率为53.85%。mgmt在不同级别脑胶质瘤患者中的阳性率差异无显著的统计学意义(χ2=4.95,p>0.05);mgmt表达的强度与脑胶质瘤的病理等级无关(p>0.05)。将Ⅰ~Ⅱ级归为良性组,Ⅲ~Ⅳ级归为恶性组,其中良性组胶质瘤组织mgmt的阳性率为45.45%(20/44);恶性胶质瘤组织mgmt的阳性率为46.87%(15/32)。mgmt在脑胶质瘤恶化程度中的阳性率差异无显著的统计学意义(χ2=0.78,p>0.05);mgmt表达的强度与脑胶质瘤恶化程度无关(p>0.05)2.76例脑胶质瘤患者中,男性33例,女性43例。男性患者中mgmt的阳性率为42.42%(14/33);女性患者中mgmt的阳性率为48.84%(21/43)。mgmt在不同性别中的阳性率比较并无显著的统计学差异(χ2=0.99,p>0.05)。年龄跨度为21~69岁,以10年为一个年龄段,共分为5组,mgmt在不同年龄中的阳性率分别为:21~30岁,阳性率44.44%(4/9);31~40岁,阳性率46.43%(13/28);41~50岁,阳性率52.38%(11/21);51~60岁,阳性率40.00%(4/10);61~69岁,阳性率37.50%(3/8)。mgmt在不同年龄中的阳性率比较并无显著的统计学差异(χ2=5.07,p>0.05)。mgmt在不同病理类型中的阳性率依次为:星形细胞瘤45.71%(16/35),胶质肉瘤55.56%(5/9),多形性胶质母细胞瘤42.86%(9/21),室管膜瘤50.00%(3/6),髓母细胞瘤40.00%(2/5)。mgmt在不同肿瘤类别中的阳性率比较并无显著的统计学差异(χ2=6.26,p>0.05)结论:1.mgmt在脑胶质瘤组织、正常组织和癌旁组织中的表达具有显著的差异。其中mgmt在脑胶质瘤中的阳性率明显高于正常组织和癌旁组织,而在正常组织和癌旁组织中mgmt的阳性率则没有明显差别。2.MGMT在不同级别,不同发展程度的脑胶质瘤患者中的阳性表达无明显的统计学差异。3.MGMT在不同性别、年龄、肿瘤类型中的表达无明显的统计学差异。4.MGMT蛋白的表达情况对临床开展肿瘤治疗有着极其重要的作用,MGMT可作为判断脑胶质瘤患者可能出现的预后情况及其对烷化剂类抗肿瘤药物是否耐药的重要标志之一,对于MGMT表达阳性的患者,在选择实施个体化治疗方案时,应避免使用烷化剂类抗肿瘤药物,从而减少肿瘤细胞耐药,改善患者的预后情况,提高患者的生活质量。5.随着现代医学和分子生物学技术的不断发展,我们还要努力寻找MGMT组织新的、更简便、更快速的检测手段,为临床的进一步应用奠定基础,为更多的患者及家庭解除痛苦,减轻负担。